Ultimate® SEC色譜柱的使用說明書

Ultimate® SEC色譜柱性能介紹
Ultimate® SEC色譜柱是矽膠基質的體(ti) 積排阻色譜柱，其色譜填料為(wei) 高純度、具有良好穩定性的矽膠微球表麵鍵合親(qin) 水性高分子聚合物。月旭公司采用特殊的表麵修飾技術，確保了該填料具有良好的穩定性和批次之間的較好重現性。
Ultimate® SEC填料采用*的化學鍵合技術，在矽球表麵鍵合了親(qin) 水性聚合物以及親(qin) 水性二醇基官能團。雙重鍵合機製使水溶性高分子聚合物、蛋白、生物酶、多肽等生物樣品的非特異性吸附極小，廣泛應用於(yu) 水溶性聚合物及生物大分子的分離和測定。

Ultimate® SEC色譜柱性能介紹

Ultimate® SEC色譜柱使用步驟：
1.將Ultimate® SEC色譜柱連接在HPLC係統上；
2.設置流速在0.8-1.0mL/min，首先用純水相平衡至少40min，然後用所使用的有機溶劑平衡至少30mi；
3.使用完畢後，先用純水相衝(chong) 洗色譜柱至少40min以上，然後用高比例的有機相衝(chong) 洗至少30min。

Ultimate® SEC色譜柱使用注意事項
1.使用前，請把色譜柱用純水衝(chong) 洗40-60個(ge) 柱體(ti) 積，以確保柱填料能夠充分被潤濕，防止色譜柱在使用過程中造成固定相塌陷；
2.色譜柱在用純水流動相分析時，需要充分地用純水流動相平衡色譜柱，待基線充分平穩後進樣分析；
3.由於(yu) 該類型色譜柱一般用的流動性是純水相的緩衝(chong) 鹽，因而色譜柱在使用完以後需要用純水流動相充分衝(chong) 洗色譜柱，以保證緩衝(chong) 鹽被充分的清除，防止緩衝(chong) 鹽對色譜柱固定相造成的傷(shang) 害；
4.長時間不使用色譜柱時，請將該類型色譜柱保存在高比例的有機溶劑-水溶液中，一般有機溶劑的比例為(wei) 90%。

Ultimate® SEC色譜柱樣品與(yu) 流動相
為(wei) 了避免色譜柱的堵塞，所有的流動相和樣品都必須用0.45μm或0.2μm的濾膜過濾後使用。Ultimate® SEC柱可以使用水或有機溶劑和水的混合物，如甲醇(或乙腈)的水溶液等作為(wei) 流動相。流動相在使用前必須脫氣處理。

Ultimate® SEC色譜柱的保養(yang)
1.溶劑
新的Ultimate® SEC柱中的流動相是90%的乙腈水溶液。長期不用其色譜柱內(nei) 矽膠填料可能會(hui) 幹涸。此時需要用10-20倍柱體(ti) 積的超純水進行衝(chong) 洗以確保色譜柱的重新活化。然後可根據所需的流動相平衡色譜柱。流速由0.2mL/min逐漸升高至所需的流速，直至基線穩定為(wei) 止。如果柱壓和基線波動較大，這可能是氣泡進入了色譜柱。這時可用較高流速衝(chong) 洗色譜柱2-5min，例如對於(yu) 7.8×300mm的色譜柱可采用流速2.0mL/min。
2.pH
為(wei) 了獲得*的分離效果和延長柱的使用壽命，盡量使用pH在2-8.5範圍內(nei) 的流動相。
3.壓力
Ultimate® SEC柱可在高至6000psi的壓力下使用，但正常的操作壓力應當低於(yu) 2000psi。長時間在高壓下使用會(hui) 損壞色譜柱和輸液泵。一般情況下，柱壓會(hui) 隨著色譜柱使用時間的增加而逐漸升高。此時建議將色譜柱反接後用合適的溶劑進行清洗、重新活化。
4.溫度
為(wei) 了獲得zui長的使用時間，*操作溫度為(wei) 10-30℃。

Ultimate® SEC色譜柱的再生步驟
Ultimate® SEC色譜柱的再生方法根據相關(guan) 的樣品純度有不同的變化，越是生物大分子，越需要經常地對柱子進行再生，因為(wei) 它們(men) 往往因為(wei) 具有較大的體(ti) 積而堵塞色譜柱，如果使用過程中發生柱壓突然升高或者色譜峰的峰型會(hui) 與(yu) 柱子發生置換。可以通過注射核糖核酸酶來測試柱子的置換情況。如果核糖核酸酶的峰有拖尾，那麽(me) 柱子需要做以下處理：
將色譜柱與(yu) 檢測器斷開；把柱子流路方向反過來，以高比例有機相(甲醇或乙腈)以0.2mL/min的流速衝(chong) 洗一整夜，用30-50倍柱體(ti) 積的超純水將色譜柱衝(chong) 洗幹淨。再生之後按照正常方向使用。