Xtimate® Sugar-Ca 色譜柱采用鈣化的聚苯乙烯/二乙烯基苯填料的色譜柱。主要用於(yu) 分析糖類產(chan) 品，甜菜，甘蔗，澱粉這些作物在水解過程中的產(chan) 物，以及用來做糖產(chan) 品的質量檢測，能夠將葡萄糖、果糖、麥芽糖、麥芽多糖從(cong) 典型的玉米糖漿中的高聚物中分離出來，也可用於(yu) 酒精的發酵過程中跟蹤監控發酵糖的減少和酒精的產(chan) 生。
使用步驟：
1．用兩(liang) 通取代色譜柱將儀(yi) 器連接，用過濾好的超純水衝(chong) 洗儀(yi) 器50ml；
2．再用分析流動相衝(chong) 洗儀(yi) 器50ml，將流速降到0ml/min；
3．將Xtimate® Sugar-Ca色譜柱連接在 HPLC係統上；
4．設置流速在 0.2-0.3ml/min直到柱溫達到設定值；
5．在柱溫達到設定值時，流速增至分析流速，流速變化以0.1ml/min為(wei) 增量,待反壓穩定後再繼續增加流速。zui大流速不應使壓力超過2000psi。
流動相要求:
此色譜柱由鈣基樹脂填裝而成，氫離子和其它離子會(hui) 取代鈣離子，或是引起與(yu) 柱中糖的置換，尤其是像蔗糖這樣易於(yu) 置換的糖。因此推薦在流動相中加入一定量的鈣離子來保持平衡和防止與(yu) 樣品的置換。推薦的流動相用去離子的無菌水，含EDTA鈣鹽約0.0001M（50mg/L）。水應去離子化，大於(yu) 2兆歐的電阻率，水中應不含多價(jia) 離子 ,尤其是過渡金屬元素和重金屬離子.使用前需用真空泵通過0.45um或更小孔徑的濾膜除去細菌和其它顆粒，溶劑過濾推薦使用溶劑過濾器。雖然流動相已經在真空過濾時脫氣，但還是應該通過以下程序來*脫氣。如果係統連續使用不止一天，請將流動相置於(yu) 錐形瓶中，放在攪拌器/電爐上，用鋁箔封上瓶口以減小蒸發，用前將流動相加熱至沸點幾分鍾，使用時保持溫度70-90℃。這個(ge) 操作能夠保證氣體(ti) (尤其是CO2)不再重新溶解在流動相中，同時也會(hui) 防止微生物的滋生。要保持裝流動相的容器幹淨，有蓋，且新鮮，流動相需每24小時重新配製。
注意事項:
通常推薦壓力不超過2000psi；
zui大流速不超過0.6ml/min(70℃)；
流動相中有機相的zui大含量為(wei) 5%(V/V),樣品中少量的乙腈，乙醇，甲醇和異丙醇不會(hui) 影響柱子的性能；柱子的溫度不要超過 95℃。通常高溫會(hui) 帶來高的分辨率，但在 90-95℃之間幾乎沒有變化，70℃以下對於(yu) 許多糖，就異構體(ti) 的分離來說不能提供足夠的分辨率，對於(yu) 乙醇的定量，柱溫應在75℃；
柱溫的快速變化不會(hui) 對柱子帶來什麽(me) 反作用，如果柱子在 60℃以下，那麽(me) zui高的流速為(wei) 0.2ml/min，由於(yu) 水在低溫時有高的粘度因此高的流速會(hui) 帶來很高的反壓；
定期反向衝(chong) 洗色譜柱(在每5L流動相之後)，這將會(hui) 有效地延長色譜柱的壽命；
流速的變化不能超過0.5ml/min,流速變化應該緩慢進行，建議改變流速時以0.1ml/min為(wei) 增量，直到反壓穩定後再繼續增加流速。任何的流速變化均要在不超過 0.5ml/min下進行；
在溶劑輸出係統中壓力限製的設定應比普通的工作壓力高出幾百psi，從(cong) 而避免任何儀(yi) 器未被注意的額外壓力升高。
保存條件:
長期保存(72小時以上不用)。關(guan) 掉柱溫箱，待柱溫冷卻到室溫，停泵。當柱子冷卻，從(cong) 係統中移出，換上起初隨柱子的堵頭，柱子在保存過程中要防止揮幹，通常的流動相都可作為(wei) 保存柱子的適宜溶劑。在冰箱中5℃保存(不要冷凍),以防止微生物的滋生；柱子拆掉後要用兩(liang) 通裝在係統上，衝(chong) 洗整個(ge) 液相色譜係統先用水，然後用甲醇，zui後儀(yi) 器係統保存在甲醇中。
在關(guan) 機後的重新啟動。當開啟帶有一個(ge) 柱溫很低的柱子的係統時，打開柱溫箱，流速開始不要超過0.2ml/min。待係統在此條件下穩定至少二十分鍾達到工作溫度後再按通常的工作條件操作。
整夜的停機(放置少於(yu) 72小時)。柱子留在係統中流速降到 0.2ml/min。循環溶劑，將流出的管路插入流動相瓶中，如果不想開著柱溫箱，那就關(guan) 掉泵和柱溫箱讓其冷卻。
在整夜停機後的開啟。打開柱溫箱，流動相的流速不要超過 0.1-0.2ml/min，保持此流速至少二十分鍾直到達到柱子工作所需溫度，然後再按照通常分析條件來設置。
故障檢查:
Sugar-Ca色譜柱是以樹脂的膨脹形態緊密裝填的，如果樣品進行了很好的前處理，那麽(me) 大部分產(chan) 生的問題都和樹脂填料有關(guan) ，由於(yu) 單向閥的損壞或是突然地反壓增加，脆弱的樹脂填料可能被泵的波動衝(chong) 到柱子的後篩板處。反壓的增加是否會(hui) 發生，要經常檢查在線過濾器以及保護柱中是否截留了微粒。如果不是此問題，那麽(me) 很可能是樹脂部分地堵在了出口端的篩板處，檢查這種情況是否發生需要關(guan) 掉泵，將柱子的流路方向反過來，然後泵流速開到0.1ml/min，20分鍾達到工作溫度後再設至工作時的流速。
柱子的再生步驟:
Sugar-Ca色譜柱的再生方法根據相關(guan) 的樣品純度有不同的變化，越是天然物(尤其是含有那些重金屬和過渡金屬元素或是有機酸的樣品)，越需要經常地對柱子進行再生，因為(wei) 它們(men) 會(hui) 與(yu) 柱子發生置換。可以通過注射蔗糖來測試柱子的置換情況。如果蔗糖的峰有拖尾,那麽(me) 柱子需要做以下處理:
配製 500ml的再生溶液(Ca EDTA 500mg /L)，把柱子流路方向反過來，在 90℃下以0.5ml/min的流速衝(chong) 洗一整夜。再生之後回到正常方向使用。
當柱子反衝(chong) 時很重要的一點是需要保持溶劑的溫度從(cong) 而確保正確的衝(chong) 洗，用冷的溶劑將會(hui) 延緩衝(chong) 洗的過程。
