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叮!您的“酶聯免疫吸附”知識大禮包已到達!

更新時間:2023-11-20 點擊次數:921


01 什麽(me) 是酶聯免疫吸附測定?

酶聯免疫吸附測定(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay,ELISA),是繼免疫熒光和放射免疫技術之後發展起來的一種免疫酶技術。自上世紀70年代初問世以來,發展迅速。 

ELISA是基於(yu) 抗原-抗體(ti) 的特異性結合反應建立起來的一種快速檢測技術 它將酶促反應的高效率和免疫反應的高度專(zhuan) 一性有機地結合起來,可對各種微量有機物含量進行測定。 


抗原、抗體(ti) 小知識

抗原決(jue) 定簇示意圖

抗原是能在機體(ti) 中引起特異性免疫應答的物質。抗原進入機體(ti) 後,可刺激機體(ti) 引起細胞免疫和產(chan) 生抗體(ti) 。抗原的反應性取決(jue) 於(yu) 抗原決(jue) 定簇。一個(ge) 抗原分子可帶有不同的決(jue) 定簇。

抗原抗體(ti) 結合反應示意圖

抗體(ti) 是指能與(yu) 抗原特異性結合的免疫球蛋白。

抗原抗體(ti) 的關(guan) 係就如同特定的鑰匙和鎖,一一對應,隻有找到正確的鑰匙--抗原才能打開對應的鎖---抗體(ti) 。


02 酶聯免疫吸附試驗原理

image.png

1、使抗原或抗體(ti) 結合在固相載體(ti) 表麵,並保持活性

2、使抗體(ti) 或抗原與(yu) 某種酶連接成酶標記抗體(ti) 或抗原

3、在測定時,把受檢抗體(ti) (或抗原)和酶標抗原(或抗體(ti) )按不同步驟與(yu) 固相載體(ti) 表麵的抗原(或抗體(ti) )一起反應。

4、采用洗滌的方法去除未結合的酶標抗原(或抗體(ti) ),最後結合在固相載體(ti) 上的酶量與(yu) 標本中受檢物質的量成一定的比例。

5、加入酶反應的底物後,底物被酶催化變為(wei) 有色產(chan) 物

6、產(chan) 物的量與(yu) 標本中受檢物質的量直接相關(guan) ,可以根據顏色反應的深淺來進行定性或者定量分析。


03 酶聯免疫吸附試驗分類

 間接法(Indirect ELISA):

將已知抗原吸附於(yu) 固相載體(ti) ,酶標記二抗

檢測待測液體(ti) 中未知抗體(ti)

image.png


雙抗體(ti) 夾心法(Sandwich ELISA):

將已知抗體(ti) 吸附於(yu) 固相載體(ti) ,酶標記一抗

檢測待測液體(ti) 中的可溶性抗原

image.png

競爭(zheng) 法(Competitive ELISA):

將已知抗體(ti) 或抗原吸附於(yu) 固相載體(ti) ,酶標記抗原或抗體(ti)

檢測待測液體(ti) 中的可溶性抗原或抗體(ti)

image.png


04 酶聯免疫吸附試驗的優(you) 勢

1、檢測速度快:可以製備成相應檢測試劑盒,多樣品同時檢測,大大縮短檢測時間。

2、特異性強:其利用抗原與(yu) 抗體(ti) 的特異性結合測定,具有選擇性高的特點。

3、靈敏度高:結果的準確性和方法的靈敏度與(yu) 儀(yi) 器分析方法一致。

4、操作簡單:不需要大型儀(yi) 器設備,試劑盒可以直接處理,不需要二次加工。

5、便於(yu) 推廣:對試驗人員的技術要求不高,便於(yu) 技術推廣。


05 酶聯免疫吸附試驗的應用

由於(yu) 酶聯免疫法具有快速、操作方便、靈敏度高的特點,適用於(yu) 現場檢測,其應用範圍也在不斷擴大,目前已被廣泛應用於(yu) 食品檢測醫學檢測中。在食品檢測中主要用於(yu) 檢測植物性食品的農(nong) 藥殘留、動物性食品的獸(shou) 藥殘留、真菌毒素、食源性微生物及食品中特殊蛋白質、重金屬等。


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