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液相色譜流動相溶劑如何選擇

更新時間:2023-07-07 點擊次數:1283


01

流動相在液相色譜中扮演的角色

目標化合物在液相色譜中的保留取決(jue) 於(yu) 該物質與(yu) 流動相和固定相間的作用強度。流動相是整個(ge) 液相色譜分離過程中的“血液",它對組分有親(qin) 和力,並參與(yu) 固定相對組分的競爭(zheng) ,因此流動相的選擇直接影響組分的分離度。

02

流動相選擇原則

1

適用性

用作流動相的溶劑應與(yu) 固定相不相溶,並能保持色譜柱的穩定性。

2

純度

流動相所用溶劑應有高純度,以防流動相中的雜質在色譜柱上積累,致使柱性能下降。

3

檢測背景值

譬如使用紫外檢測器時,所用流動相在檢測波長下應沒有吸收或吸收很小;當使用示差檢測器時,應選擇折射率與(yu) 樣品差別較大的溶劑作為(wei) 流動相。

4

粘度與(yu) 沸點

溶劑的粘度和沸點要適當。

使用低粘度溶劑可以減少溶質的傳(chuan) 質阻力,有利於(yu) 提高柱效,但如yi醚等溶劑也不宜使用,因為(wei) 粘度過低的溶劑容易在色譜柱或檢測器內(nei) 形成氣泡,影響分離。而粘度高溶劑會(hui) 影響溶質的擴散、傳(chuan) 質,降低柱效,還會(hui) 使柱壓升高,分離時間延長。

對於(yu) 製備和純化樣品所用的流動相最好選用沸點較低的溶劑,這樣易用蒸餾等方法把溶劑從(cong) 柱後收集液中去除,有利於(yu) 樣品的純化。

5

對樣品的溶解度

如果流動相對樣品的溶解度較差,樣品會(hui) 在色譜柱柱頭沉積,導致柱效下降。

6

毒性

應盡量避免使用具有顯著毒性的溶劑,減少環境汙染和確保實驗人員的安全。

03

常用的流動相

反相色譜是大多數樣品分析的shou選分離模式,該模式一般比其他液相色譜模式的普適性更好、更方便、更容易獲得令人滿意的分離效果。在反相色譜中,一般使用非極性/弱極性鍵合固定相色譜柱,如C18柱、苯基柱等。

流動相的選擇通常以水相(包括加入一定量的酸、堿、無機鹽緩衝(chong) 液等)做基礎溶劑,再加入一定量的能與(yu) 水互溶的如甲醇(質子給體(ti) )、乙腈(質子受體(ti) )、四氫呋喃(偶極溶劑)等極性溶劑,其極性及其K值(分配係數)和分離選擇性有顯著影響。下表列出一些常用溶劑的極性參數p’。

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04

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