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基礎打好才能走的更遠!來看看固相萃取的基本原理

更新時間:2023-05-08 點擊次數:1229

01 相關(guan) 術語

1. 預處理(condition):使SPE柱達到萃取的最佳狀態,以便吸附目標化合物。(活化 平衡)

2. 洗滌(wash):目的是將幹擾目標化合物分析的雜質在洗脫前去除。(淋洗)

要求:最大限度去除雜質,而對目標化合物沒有明顯損失。     

3. 洗脫(eluton):用適當的溶劑將目標化合物從(cong) SPE柱上洗脫出來。

溶劑應選擇:最大限度地將目標化合物洗脫,共洗脫雜質越少越好。

4. 載樣(load):即樣品上樣。樣品載入並通過SPE柱的過程。(上樣)

5. 幹擾物(interferences):也稱雜質。是指對目標化合物的萃取或檢測起到負麵作用的物質。

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02 基本原理

利用固體(ti) 吸附劑(填料)對於(yu) 液體(ti) 樣品中的目標化合物和幹擾化合物進行有選擇地吸附,然後用溶劑洗脫,達到去除幹擾或富集目標化合物的目的。

本質:固相吸附劑上官能團與(yu) 目標化合物的官能團之間的作用力。


項目案例

 液相上的分離 

01 非極性作用力 ——

反相吸附劑/非極性吸附劑/疏水型吸附劑

固相萃取材料官能團上的碳氫鍵與(yu) 目標化合物的碳氫鍵之間的力——範德華力、色散力。

例:C18(Si-)、C8(Si-)、C4(Si-)、C2(Si-)、PHE(苯基)(Si-)、CH(環己基)(Si-)、石墨炭黑、多孔石墨化碳、PSD等。通常非極性的反相SPE柱比較適用於(yu) 從(cong) 極性基質中萃取分離非極性及中等極性的目標物。

02 極性作用力 ——

正相吸附劑/極性吸附劑

固相萃取材料極性表麵與(yu) 樣品中目標化合物的極性官能團之間的力——氫鍵、誘導力、偶極-偶極相互作用、π-π相互作用等。

常見極性官能團:羥基、胺基、巰基、羰基、芳香環以及含氧、氮、硫、磷等雜原子基團。

在極性作用力的固相萃取中,樣品的基質多為(wei) 非極性,目標化合物多含有極性較大的官能團。

例:Si、氧化鋁、Diol(二醇基)、NH2(氨基)、CN(氰基)等;

石墨炭黑和多孔石墨化碳也可以用於(yu) 對極性化合物的萃取。

03 離子作用力 ——

離子交換型吸附劑

發生在帶相反電荷的目標物與(yu) 固相萃取吸附劑官能團之間——靜電吸引;

三種作用力中強度最大、選擇性最好。

有效萃取的條件:

1)環境的pH必須使目標化合物和吸附劑帶相反電荷;

2)環境不能含有高濃度的帶有和目標化合物相同電荷的競爭(zheng) 化合物。

例:PSA(Si-)、PRS(Si-)、SAX(Si-)、SCX(Si-)、WCX(Si-)、MCX(PS-DVB-)、MAX(PS-DVB-)、PWAX(PS-DVB-)等。

04 多種作用力 ——

次級相互作用

例:以鍵合矽膠為(wei) 吸附劑的固相吸附填料(鍵合矽膠本身的矽羥基),GCB/PSA、GCB/NH2等。

05 分子識別機理 ——

免疫親(qin) 和固相萃取(IASPE)

免疫親(qin) 和柱中含有和目標物抗體(ti) 結合在一起的凝膠,樣品中的目標毒素經過提取、過濾、稀釋,然後緩慢的通過親(qin) 和層析柱,在免疫親(qin) 和柱內(nei) 目標物與(yu) 抗體(ti) 結合,其他的無關(guan) 物質不會(hui) 結合而直接通過免疫親(qin) 和柱,之後洗滌免疫親(qin) 和柱wan全除去沒有被結合的其他無關(guan) 物質。最後加入甲醇將目標物釋放,然後注入到分析儀(yi) 器中進行進一步的檢測。

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