根據實驗需求配製相應的流動相接入儀(yi) 器的各個(ge) 通路,並配製泵頭和自動進樣器的清洗溶液(10% IPA)。
打開泵、自動進樣器、柱溫箱和檢測器模塊的電源。
打開電腦,啟動工作站,查看各模塊的連接狀態,斷開檢查器流路,用低流速啟動係統,觀察係統壓力,排盡假期前保存的純MeOH溶液,壓力穩定,接入檢查器流路。
開排氣閥,單個(ge) 通路排氣泡,排完後記得旋緊。
設置流動相初始比例開始平衡;若流動相含有緩衝(chong) 鹽,請先用10%的有機相水溶液進行過渡,再換成儀(yi) 器方法初始比例的流動相進行平衡。
執行自動進樣器清洗命令,並將進樣閥切換至Inject的狀態進行平衡。
設置方法所需的柱溫箱溫度。
若使用VWD/DAD檢測器,待泵開啟約5min後再打開氘燈或鎢燈,並設置檢測波長等。
若使用FLD檢測器,需設置池溫、激發波長、發射波長、采集頻率等。
若使用RI檢測器:先打開衝(chong) 洗閥(purge=on)衝(chong) 洗參比池約20min,再關(guan) 閉衝(chong) 洗閥(purge=off),並設置池溫和極性。
若使用ELSD-5450檢測器,首先開啟氮氣壓力到3.5bar,確保能持續供氣,設置到高溫,如80℃,衝(chong) 洗25min左右。監測基線,待係統流路充分平衡後,基線正常穩定,可以開始進樣分析。
開機後壓力在一段時間逐漸變化(升高或降低),這往往是流動相在色譜柱內(nei) 還沒有平衡好、柱箱溫度還沒有恒定。如果儀(yi) 器沒有問題,隻要多平衡一會(hui) 就會(hui) 穩定。若使用的是梯度程序,由於(yu) 流動相的比例正處在變化中,壓力也會(hui) 跟隨變化。
泵無壓力,不過液,通常會(hui) 出現在長假之後,我們(men) 排查一下,如果管路裏有大段的空氣,重新Purge之後還是不能正常過液,我們(men) 可以使用注射器吸出液體(ti) 重新連接管路,如單向閥內(nei) 寶石球粘滯問題,可更換單向閥閥芯或用甲醇超聲後裝回。
液相色譜儀(yi) 開機後如果壓力瞬間變化>3MPa,通常以下四種情況,可依次排查解決(jue) :
是否有氣泡;是否有漏液;單向閥不良;或者泵工作相位不正確,可逐個(ge) 排除。