非水反相色譜法(NARP)為(wei) 反相色譜法的一種特殊模式,主要用來分離疏水性很強不溶於(yu) 水的樣品如脂類、合成聚合物等,這些樣品的保留能力很強,流動相全部由有機溶劑組成,不使用強極性的水溶液。非水反相高效液相色譜法可做為(wei) 脂溶性藥物和非極性含氮有機化合物及其鹽類藥物的常規分析方法[1],中藥中的一大類有效成分脂溶性大,不溶於(yu) 水,甚至也難溶於(yu) 甲醇,因此非水反相色譜也常應用於(yu) 中藥質量控製[2]。
月旭科技色譜柱應用於(yu) 某中藥配方顆粒中甘油酯類樣品分析案例如下:

非水反相色譜中的流動相是由極性較強的有機溶劑A和極性較弱的有機溶劑B組成。A溶劑常用乙腈或甲醇,B溶劑常用四氫呋喃、異丙醇、二氯甲烷、甲基叔丁基醚或者其他極性較弱的有機溶劑。

非水反相色譜法方法優(you) 化同反相色譜法,主要通過改變%B或B溶劑的極性來調節,等度或梯度都能使用,同時柱溫對樣品的分離也有影響。一般shou選采用ACN(A)和THF(B)的混合溶劑為(wei) 作為(wei) 初始流動相。若用100%THF樣品保留仍太強,可以用極性較弱B溶劑(如二氯甲烷或氯仿)來替換,但是要考慮使用二氯甲烷或氯仿的檢測波長。
需注意,在使用非水反相色譜時,需要將整個(ge) 係統和色譜柱中的水相徹di衝(chong) 洗過渡,儀(yi) 器係統應保證已升級到正相,避免硬件損傷(shang) 。
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[1] 《非水反相高效液相色譜法在非極性藥物分析中的應用研究》
[2]《非水反相液相色譜法在中藥質量控製中的應用》