抽絲剝繭探案四：液相係統壓力高，還可能是這個原因

Hello小夥(huo) 伴們(men) 大家好，液相色譜是我們(men) 常用的大型分析儀(yi) 器之一，原理及操作我們(men) 自然是非常的熟悉了，但每次提到液相色譜故障排查的時候有些小夥(huo) 伴就會(hui) 頭疼了，那種肉眼可見的堵和漏是比較容易解決(jue) 的，難的是那種不重現沒有規律的問題。今天小編就給大家揭秘液相與(yu) 光化學衍生器聯用的故障排查實例一則，思路和邏輯很重要，記得做筆記奧。

卷宗案情陳述

事情是這樣的，客戶做黃曲黴毒素檢測，購買(mai) 了WelView光化學衍生器後，客戶反饋係統壓力高，超壓停機，另外黃曲黴毒素G1和G2分離度也達不到藥典要求，也就是R＜1.5。客戶申請了其它品牌液相的工程師，解決(jue) 了所用液相堵塞問題，但是超壓問題依然存在，於(yu) 是又申請我們(men) 的售後小哥哥上門排查光化學衍生器。

月旭售後黃探長奔赴案發現場

由於(yu) 客戶陳述過使用其它品牌ODS-2色譜柱分離度達不到藥典要求，我們(men) 的黃探長申請了月旭新色譜柱，並攜帶標準品奔赴客戶現場了。

黃探長明察秋毫排查故障原因

接下來我們(men) 先分析下客戶存在的問題：

1、LC-20AT+FLD液相係統搭配光化學衍生後超壓報警停機，由於(yu) 客戶自動進樣器能承受的最大壓力是20Mpa，超過設定值係統會(hui) 自動停止工作。

2、色譜柱分離效果不佳，達不到藥典要求，分離度不佳跟色譜柱有直接關(guan) 係，換柱子是最直接快速高效的方法。

實驗條件：

流動相

MeOH：ACN：H2O=40：18：42。

檢測器FLD 

激發波長365nm，發射波長450nm。

黃探長到現場後首先要排查原因，具體(ti) 步驟如下：

1、觀察光化學衍生器開機正常，結合之前客戶的色譜圖，判斷衍生效果良好。

2、排查係統壓力高原因，我們(men) 售後小哥更換上月旭ODS-3新的活化好的色譜柱後，比較前後壓力，排查是否是舊柱子的原因。壓力依然高，並非柱子堵塞。

3、拆掉柱子係統背壓0.9Mpa，無堵塞現象，排除液相係統堵塞原因。

4、通過上述三步排查後，猜測可能是係統未平衡好，於(yu) 是再次平衡1h，係統壓力17Mpa，依然較高，無法串聯光化學衍生器使用。

5、於(yu) 是黃探長考慮溫度對柱壓的影響，將柱溫箱溫度設置為(wei) 40℃，平衡好後壓力降至12-13Mpa，串聯好光化學衍生器。

6、待係統穩定後，進樣25μL混標，出峰正常。

7、鑒於(yu) 之前客戶使用其他品牌ODS-2色譜柱分離度達不到藥典要求，黃探長分別使用ODS-3及XB-C18兩(liang) 種不同的色譜柱供測試。

可以看出月旭ODS-3符合藥典要求，客戶對衍生效果也非常滿意。問題解決(jue) 。

案情回顧總結

黃探長的工作圓滿完成，我們(men) 回顧一下整個(ge) 案子的過程便於(yu) 總結經驗。在以後的工作中遇到問題，可以獨立判斷原因。

接下來我們(men) 來了解下液相係統壓力的影響因素。

案情拓展：液相係統壓力影響因素

影響係統壓力的因素主要有流動相的溶劑組成、溫度及流速這三方麵。

１、流動相的粘度是產(chan) 生反壓的主要原因，下圖為(wei) 有機溶劑－水的粘度隨組成與(yu) 壓力的關(guan) 係圖：

由上圖可以看到，乙腈－水比例為(wei) （20：80）、甲醇－水比例為(wei) （40：60至50：50）時，係統的壓力最大。因此，在做實驗時應盡量避開這個(ge) 比例範圍。另外，異丙醇粘度大，一般不作流動相使用。

２、流速對反壓的影響是線性關(guan) 係，流速增加，反壓亦增大。

３、溫度對反壓的影響是反比關(guan) 係，溫度升高，反壓降低，對某些流動相的影響更大一些。

４、液相色譜儀(yi) 各模塊之間的連接管路也會(hui) 產(chan) 生壓力，係統壓力與(yu) 管路的長度成正比，與(yu) 管路直徑的四次方成反比（1/4D）。上述考慮的是柱外因素對係統壓力的影響，色譜柱對係統壓力的影響也很大，反壓與(yu) 色譜柱長度成正比，與(yu) 填料顆粒度的平方成反比（2.5μｍ填料比3.5μｍ填料反壓高）。

常見壓力變化及原因

造成壓力高問題的主要原因：

１）溫度太低；

２）流速太高；

３）流動相粘度大；

４）管路堵塞；

５）儀(yi) 器或色譜柱堵塞；

６）壓力傳(chuan) 感器問題。

產(chan) 生壓力低情況的可能原因：

１）係統內(nei) 有滲漏處；

２）單向閥堵塞；

３）入口管路有氣泡；

４）溶劑濾頭堵塞；

５）所用溶劑不正確，儲(chu) 液瓶中無溶劑；

６）溫度太高，流速太低；

７）泵未輸送流動相；

８）泵關(guan) 閉或保險絲(si) 斷了。

造成壓力波動問題的主要原因：

１）管路脫氣機排氣不充分；

２）流動相未正確脫氣；

３）所用溶劑不混溶或易揮發；

４）壓力傳(chuan) 感器及泵問題。