手把手教你看高分辨質譜的色譜質譜圖

分辨率是指質譜儀(yi) 區分兩(liang) 個(ge) 質量相近（質量差為(wei) Δm）的離子的能力。分辨率主要有10%峰穀比和半高峰寬兩(liang) 種計算方式。

10%峰穀計算方式如下圖（圖來源網絡）：

離子豐(feng) 度（Abundance of ions）：檢測器檢測到的離子信號強度。

離子相對豐(feng) 度（Relative abundance of ions）：以質譜圖中zhi定質荷比範圍內(nei) zui強峰為(wei) 100％， 其它離子峰對其歸一化所得的強度。

基峰（Base peak）：在質譜圖中，zhi定質荷比範圍內(nei) 強度最大的離子峰叫作基峰。基峰的相對豐(feng) 度為(wei) 100％。

總離子流圖（Total ions current，TIC）：在選定的質量範圍內(nei) ，所有離子強度的總和對時間或掃描次數所作的圖。

提取離子色譜圖（Extracted ion chromatogram，EIC）：全掃描質譜中提取的某個(ge) 特定質荷比的色譜圖。

質量色譜圖（Mass chromatograph）：zhi定某一質荷比的離子強度對時間或掃描號所作的圖，也是我們(men) 通常所說的質譜圖。

接下來我們(men) 來通過實例來看高分辨質譜的強大用處吧。以穀氨酰胺^-13C₅^-15N₂培養(yang) 細胞，實測細胞中穀氨酰胺的代謝物穀氨酸為(wei) 例。穀氨酸分子式為(wei) C₅H₉NO₄，平均分子量為(wei) 147.1293，單同位素分子量為(wei) 147.05316，理論計算[M+H]+質核比（m/z）為(wei) 148.0604343。圖中上圖為(wei) 穀氨酸提取離子色譜圖（保留時間8.79min），下圖中為(wei) 穀氨酸的質譜圖。色譜圖中隻能看到一個(ge) 峰，而質譜圖顯示出8.79min處的色譜圖包含多個(ge) 穀氨酸同位素標記物（見圖標記）。從(cong) 圖中我們(men) 可以知道僅(jin) 用色譜我們(men) 是不能判斷出穀氨酸具有多種同位素標記。

下圖為(wei) 高分辨質譜（分辨率70000）測得的穀氨酸^-13C₃質譜圖（[M+H]+理論值為(wei) 151.0705，實測值151.0704，誤差為(wei) 0.66ppm）和穀氨酸¹³C₂^-15N₁質譜圖（[M+H]+理論值為(wei) 151.0642, 實測值151.0643，誤差為(wei) 0.66ppm）。如果我們(men) 使用的是低分辨率的質譜，我們(men) 觀察到的僅(jin) 是m/z為(wei) 151.07的一個(ge) 峰，而不能觀察到不同同位素標記的兩(liang) 個(ge) 峰。

高分辨質譜圖還能查看特定質核比的二級質譜圖，通過二級譜圖我門可以很快對化合物進行定性。以2-羥基丁酸和3-羥基丁酸在HILIC條件下測試為(wei) 例，可以通過m/z=103.0405的二級譜圖判斷，2-羥基丁酸具有特征離子57.0347，而3-羥基丁酸具有特征離子59.0139，從(cong) 而快速判斷出2.41min為(wei) 2-羥基丁酸，3.42min為(wei) 3-羥基丁酸。