提效減耗！HPLC方法如何轉換為UHPLC方法？

● 相同的選擇性：選擇相同品牌，相同鍵合工藝製成的填料僅(jin) 僅(jin) 是粒徑不一致。

● 相同或者更大的柱長粒徑比：這是保證具有相當或者更高的理論塔板數。

2. 樣品濃度不改變，進樣體(ti) 積與(yu) 柱體(ti) 積成正比

例如：

HPLC柱：4.6*150mm，5μm 進樣體(ti) 積：20μL

UHPLC柱：2.1*100mm，進樣體(ti) 積則為(wei) ：

3. 梯度洗脫程序的轉換

等度方法隻需要調整流速和進樣量，如果是梯度洗脫則需調整梯度洗脫程序。調整的依據，需計算在幾何縮放的流速下輸送相同倍數柱體(ti) 積溶劑到目標柱需要的時間。

同時，由於(yu) 不同儀(yi) 器之間係統體(ti) 積存在差異，也需要在轉換時加以考慮。梯度程序轉換的計算過程這裏不做詳細描述。通常色譜儀(yi) 器均配備轉換軟件，輸入原始洗脫程序，軟件可自動計算並轉換為(wei) 目標儀(yi) 器的洗脫，然後根據色譜峰分離情況進行人工微調。

1. 改善分離度：調整梯度洗脫程序，增加長度是便捷可行的措施；

2. 如果破壞試驗檢測的雜質情況不一致，轉換後的雜質多且物料平衡優(you) 於(yu) 前者，兩(liang) 者測定結果沒有明顯區別，轉換成功；

3. 如果結果明顯不一致，或涉及不合格情況，應匯報相關(guan) 負責人，是否需要對原方法進行再評估或放棄方法轉換。

1. 原則：係統適用性實驗不符合要求；

2. 分離度調整後達不到要求；

3. 破壞性實驗檢測出來物料平衡明顯不如HPLC法，方法優(you) 化後不能解決(jue) ；

4. 檢測結果與(yu) HPLC不一致，甚至出現不合格，那需要對原方法進行評估或者放棄方法轉換。

1. 原則：係統適用性實驗符合要求；

2. 峰純度達到要求；

3. 分離度達到要求；

4. 靈敏度達到要求；

5. 沒有係統適用性要求的項目進行樣品2-3種條件的破壞性實驗，雜質分離和物料平衡均要相當。