SPE部分常見問題及解決方法

固相萃取，簡稱SPE，是近年發展起來一種樣品預處理技術，由液固萃取柱和液相色譜技術相結合發展而來，主要用於(yu) 樣品的分離、純化和濃縮，與(yu) 傳(chuan) 統的液液萃取法相比較可以提高分析物的回收率，更有效的將分析物與(yu) 幹擾組分分離，減少樣品預處理過程，操作簡單、省時、省力。廣泛應用在醫藥、食品、環境、商檢、化工等領域。

在實驗當中，使用SPE的過程中常常會(hui) 遇到各種各樣的問題，如回收率、流速、極性等問題。而具體(ti) 問題需要具體(ti) 分析，因為(wei) 麵對不同實驗，各個(ge) 實驗室的實驗技術、環境及時間都是不一樣的，這也導致問題原因也各不相同。

SPE的回收率偏低是最常見的問題，最常見的原因可能就是目標物沒有被小柱填料保留，或者目標物沒有wan全洗脫。

原因1：SPE柱的極性不合適。

解決(jue) 方法：選擇其他低極性或者選擇性弱的SPE柱。

原因2：洗脫溶劑不夠強，無法將目標物化合物從(cong) SPE柱上洗脫。

解決(jue) 方法：改變洗脫溶劑的pH，以增加其對目標化合物的親(qin) 和力。

原因3：洗脫溶劑體(ti) 積太小。

解決(jue) 方法：增加溶劑體(ti) 積。

在同一批SPE產(chan) 品中，SPE的流速可能會(hui) 存在快慢不一的情況，而SPE流速過快不利於(yu) 目標化合物在填料上的保留，也會(hui) 極大影響溶劑與(yu) 目標化合物或者填料的相互作用，從(cong) 而影響保留或者洗脫過程。過慢則會(hui) 增加實驗時間。

原因1：填料量、緊密度等小柱因素會(hui) 影響流速的快慢。

解決(jue) 方法：可借助固相萃取裝置或者泵流操作架等進行流速控製，流速低於(yu) 5mL/min時結果較為(wei) 穩定，部分實驗需更慢。流速較慢則可施加外力增速。

原因2：樣品存在過多的顆粒，小柱堵塞，導致流速降低。

解決(jue) 方法：對樣品進行過濾或者離心。

原因3：樣品溶液粘度太大。

解決(jue) 方法：可用溶劑對樣品進行稀釋。

填料存在最大吸附量上限，當超過最大吸附量上xian時會(hui) 造成小柱吸附超載，從(cong) 而導致目標物流失。同時在未規定SPE規格的情況下，也可根據吸附容量去計算合適的填料規格。

1.矽膠基質：柱容量一般不超過SPE填料質量的5%，例如100mg/mL的C18小柱可以保留5mg的化合物。

2.聚合物基質：柱容量是矽膠基質吸附劑的3倍，一般不超過SPE填料質量的15%，例如100mg/mL的BRP小柱可以保留15mg的化合物。

3.離子交換吸附劑：交換容量為(wei) 0.25-1mmol/g，1mmol/g表示1g吸附劑能吸附1mmol的一價(jia) 帶電物質。

在使用固相萃取小柱進行樣品前處理時，若出現萃取效果重現性差，可能的原因及改進辦法如下：

原因1：上樣前柱床幹涸。

解決(jue) 辦法：重新活化並平衡SPE小柱。

原因2：過柱流速過快。

解決(jue) 辦法：降低流速。

原因3：清洗溶劑洗脫能力太強。

解決(jue) 辦法：先讓洗脫液滲入小柱，然後再對小柱進行抽真空或者加壓，並控製流速1-2mL/min。

原因4：超出小柱的載樣能力。

解決(jue) 辦法：減小載樣量，或者換用填料規格更大的SPE小柱。

在使用SPE的過程中，可能會(hui) 因為(wei) 小柱、溶劑、實驗技術等的選擇，導致最終的淨化結果達不到預期效果。

原因1：淨化模式不適用。

解決(jue) 辦法：可優(you) 化淨化模式，通常而言采用保留目標化合物的模式會(hui) 比保留雜質的模式淨化效果好，如果正在分析的項目為(wei) 某一種或某一類化合物分析，可以采用保留目標化合物的淨化模式。如果不止一種SPE柱可用於(yu) 目標化合物的淨化時，也可挑選選擇性好的吸附劑，一般離子交換>正相>反相。

原因2：淋洗液或者洗脫液不適用。

解決(jue) 辦法：根據實驗優(you) 化淋洗液或者洗脫液。

原因3：SPE小柱當中存在少量幹擾物。

解決(jue) 辦法：對SPE小柱進行合理處理，將SPE柱有效活化。