豬肉中氯黴素的測定

氯黴素（chloramphenicol，CAP）是一種廣譜性抗生素，是某些微生物，如（Streptomyces venezuelae）的次生代謝產(chan) 物，能有效地抗革蘭(lan) 氏陽性、革蘭(lan) 氏陰性、裏克次氏體(ti) 、支原體(ti) 、衣原體(ti) 等微生物。自1950年以來，氯黴素因方便適用，價(jia) 格便宜，而作為(wei) 獸(shou) 藥被廣泛的使用。氯黴素因被發現對人體(ti) 骨髓造血機能有抑製作用，可引起人的粒細胞缺乏病，再生障礙性貧血和溶血性貧血，甚至可導致食用者死亡。

目前，檢測氯黴素的方法大致可分為(wei) 篩選方法和確證方法。

常用的篩選方法有微生物學方法、放射免疫法和酶聯免疫法。微生物法靈敏度低、反應選擇性差；放射免疫法存在同位素半衰期短、放射性汙染等不足；酶聯免疫法作為(wei) 目前檢測氯黴素的主要方法，又有假陽性高、不能確證的缺點。

確證方法中氣質聯用法需要對氯黴素分子中的兩(liang) 個(ge) 羥基進行衍生化以提高其揮發性，實驗周期長，步驟繁瑣。LC-MS法具有定性、定量準確，檢測限低，無需衍生化等優(you) 點。

GB 31658.2-2021 食品安全國家標準 動物性食品中氯黴素殘留量的測定 液相色譜-質譜/質譜法

稱取樣品 5.00g於(yu) 50mL離心管中，加入4%氯化鈉溶液5mL，乙腈5mL，渦旋2min，8000 r/min，離心5min，取上清液，殘渣重複提取1次，合並上清液。加入正己烷5mL，渦旋振蕩1min，4000r/min，離心5min，棄去上層液，正己烷重複處理1次。加水飽和的乙酸乙酯溶液5mL ，渦旋60s，4000r/min，離心5min，上層液轉移到15mL離心管中，重複提取1次，合並提取液，45℃氮氣吹幹，加水-乙腈（95:5）3mL，溶解，備用。

取固相萃取柱Welchrom^® C18E 500mg 3mL，依次用甲醇、水各10mL預洗；

取備用液過柱；

加水洗柱2次，每次3mL；

加入4mL甲醇水（50:50）洗脫，過柱流速為(wei) 1滴/s；

加水飽和乙酸乙酯溶液4mL，渦旋1min，4000r/min，離心5min，取上層液，重複處理1次，合並上層液，氮氣吹幹。流動相1mL溶解，混勻，過0.22μm濾膜，上機。

注：由於(yu) 填料較厚，導致無法自然滴落，需要使用真空泵，保持1滴/s流速。

色譜柱：月旭Boltimate^® LP-C18 Core Shell (2.1×150mm，2.7μm)。

流動相：甲醇：水=50：50；

柱溫：30℃；

流速：0.3 mL/min；

進樣量：5μL。

離子源：ESI；

檢測方式：MRM；

幹燥氣：氮氣，350℃，流速：1000L/Hr；

碰撞氣：氬氣；

離子噴霧電壓：1.5kV。