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021-50276769在色譜分析過程中常常需要使用緩衝(chong) 鹽來調節流動相的pH值，緩衝(chong) 鹽的不當使用對色譜柱可能造成柱壓升高、柱效下降以及使化合物的保留時間發生變化等影響。
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柱壓升高
原因：緩衝(chong) 鹽使用不當導致緩衝(chong) 鹽析出，堵塞塞板和鍵合相顆粒之間的孔隙，阻礙流動相傳(chuan) 質，引起柱壓升高；
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相同化合物的保留時間發生變化
原因：如果沒有衝(chong) 洗幹淨就進行進樣，色譜柱內(nei) 含有的鹽會(hui) 使化合物的保留時間發生變化；
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柱效下降
原因：
1）有些緩衝(chong) 鹽會(hui) 滲入到鍵合相的深處，損害矽膠基體(ti) ，導致色譜柱鍵合相流失，柱床變鬆，柱效下降；
2）凝結在鍵合相表麵，使C18碳鏈難以舒展，對物質的保留能力下降，導致柱效下降。因此用過緩衝(chong) 鹽後需要對色譜柱進行衝(chong) 洗，水中緩衝(chong) 鹽濃度較大時應特別引起注意。
那麽(me) 如何正確使用緩衝(chong) 鹽呢？
使用前的處理：在使用緩衝(chong) 鹽作流動相之前需要用不含緩衝(chong) 鹽的流動相衝(chong) 洗色譜柱，直至基線平穩。原則上，用於(yu) 衝(chong) 洗的流動相與(yu) 分析時所用的流動相含水的比例相同（或含水更多），不同的隻是用於(yu) 衝(chong) 洗用的流動相中不含緩衝(chong) 鹽。緩衝(chong) 鹽通常易溶於(yu) 水，難溶於(yu) 有機溶劑。用含緩衝(chong) 鹽的(特別是做流動相的水為(wei) 飽和的緩衝(chong) 鹽溶液時)流動相進行分析時，如果分析前色譜柱中用於(yu) 保存色譜柱的流動相中含水的比例相對較小，不先衝(chong) 洗掉，接下來做樣品的時候所用的流動相中如果有機溶劑含量大，而其比例中所含的水又不足以溶解該緩衝(chong) 鹽時，緩衝(chong) 鹽將會(hui) 在色譜柱柱體(ti) 上析出，沉積下來，這將可能導致上述對色譜柱的損害。
使用後的處理：用與(yu) 分析時含水比例相同的流動相（與(yu) 分析用流動相wei一的區別是，用於(yu) 衝(chong) 洗的流動相不含緩衝(chong) 鹽）進行衝(chong) 洗約30min，直至基線平穩。如果該色譜柱在接下來很長的一段時間內(nei) 不使用，要長期保存，則需再加上一步，即用純的有機溶劑衝(chong) 洗一遍，直至基線平穩。
使用緩衝(chong) 液要注意幾點
01
避免使用鹽酸鹽，鹽酸鹽對鋼質有腐蝕作用。
02
緩衝(chong) 液是良好的菌類培養(yang) 液，緩衝(chong) 液最好要現配現用。
03
實驗後不可用有機溶劑直接過度，有機溶劑會(hui) 處使鹽類析出，造成液路或色譜柱堵塞。
04
使用緩衝(chong) 液要及時掌握pH範圍，做到胸中有數。
05
清洗液路和柱子時，有溫控可加熱到30攝氏度易於(yu) 衝(chong) 洗。
06
長時間用緩衝(chong) 溶液要注意觀察接頭處有無析出，若有白色鹽類析出，可考慮一定周期用10%硝酸衝(chong) 洗一下液路（拆下柱子，走30mL，再用5倍水衝(chong) 洗）可以避免液路的堵塞。
07
選擇緩衝(chong) 液要用可靠的試劑，避免不純的鹽類造成不必要的麻煩。
如果流動相中有機溶劑的比例很高是不能用來衝(chong) 洗緩衝(chong) 鹽的，是洗不出來的。通常C18柱先用5%~10%的甲醇衝(chong) 洗，是可以把緩衝(chong) 鹽衝(chong) 洗出來的，然後用純的有機溶劑來保護柱子。Z 好的方法是使用與(yu) 流動相相同濃度不含鹽的流動相進行清洗。但就是速度慢一些。用水是為(wei) 了快速替換，一般在15分鍾以內(nei) 最好，且用0.8的流速較好。如果用純水衝(chong) ，容易造成鍵合的碳鏈的流失，最好用5%~10%甲醇水溶液衝(chong) 。可以用純水代替流動相中的緩衝(chong) 液，有機相不變。這樣衝(chong) 洗柱子比較穩妥。
小結
正確使用緩衝(chong) 鹽很有必要，既可以防止緩衝(chong) 鹽析出，也可以達到提高色譜柱使用壽命的目的。我們(men) 不妨用一句話來總結它的使用方法：用前要過濾，用後需衝(chong) 洗。
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