親水作用色譜法的優點和常見問題

常規應用於(yu) HILIC色譜的固定相有：純矽膠柱、氨基柱、酰胺基柱、兩(liang) 性離子柱等。純矽膠柱有固定相不易流失的優(you) 點，在使用CAD、ELSD和LC-MS檢測器時，zui受huan迎；氨基柱，在HILIC色譜中的應用，特別適合碳水化合物（糖類）分離；兩(liang) 性離子柱，不再需要使用離子對試劑，具有ji強的親(qin) 水性，能夠有效地保留RP-LC中保留弱或不保留的強極性離子型化合物以及堿性藥物分子。

同樣是Silica，NH₂，與(yu) 用於(yu) 正相色譜中的色譜柱不同，專(zhuan) 為(wei) HILIC色譜設計的色譜柱，可以用於(yu) 水-有機物的流動相中，換句話說，HILIC色譜對固定相的耐水性要求更高，否則會(hui) 因固定相的水解，出現基線噪音大、色譜柱壽命短等問題。所以用於(yu) 正相色譜中的色譜柱，不一定能用於(yu) HILIC色譜。而適用於(yu) HILIC色譜的色譜柱，可以用於(yu) 正相色譜中。

極性溶質在親(qin) 水作用色譜裏優(you) 先被保留，這意味著很多在反相色譜裏保留很弱的物質可以輕鬆地使用親(qin) 水作用色譜進行分離。

親(qin) 水作用色譜有以下幾個(ge) 潛在的優(you) 點：

與(yu) 反相色譜法相比，親(qin) 水作用色譜中最常見的問題應該是不理想的峰形（前沿或者拖尾）。這正反映了親(qin) 水作用色譜作為(wei) 一種新的分離方法還沒有得到如RPC一樣廣泛應用的事實。親(qin) 水作用色譜可能還在使用A類矽膠作為(wei) 填料。我們(men) 還需要繼續改良HILIC色譜柱以及想辦法對峰形進行改善。

當遇到峰形問題時，第一個(ge) 嚐試的方法應該是增加流動相中緩衝(chong) 液的濃度。有些樣品要求緩衝(chong) 液濃度高達100mmol/L才能得到比較好的峰形。一般情況下樣品應該用流動相溶解，但有時為(wei) 了改善峰形，可以把溶解樣品用的有機溶劑的比例增加。如果峰形還是沒有得到改善，那麽(me) 就可以考慮更換柱子或者調整流動相的pH。流動相中應該一直含有一定量的水，水的比例至少應達到3%-5%。

在運行質譜檢測的時候，有些鍵合相柱會(hui) 發生柱流失的問題。通常的解決(jue) 辦法是改用矽膠柱或者別的鍵合相的色譜柱。有文獻指出，使用親(qin) 水作用色譜時，某些樣品組分會(hui) 與(yu) 矽膠柱產(chan) 生不可逆的結合，這時可以考慮改用鍵合相的HILIC柱。