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Welchrom® T-2毒素免疫親(qin) 和柱是月旭科技推出的前處理專(zhuan) 用柱係列之一,T-2毒素免疫親(qin) 和柱適合於(yu) 和HPLC、LC-MS及T-2酶免分析試劑盒結合使用,定量檢測T-2毒素。適用於(yu) 穀物、食品等樣本中的T-2毒素淨化處理,提高了樣品的純度,純化後的提取液可用不同的分析方法測定。
月旭科技根據《GB 5009.118-2016 食品安全國家標準 食品中T-2毒素的測定》開發出了Welchrom® T-2毒素免疫親(qin) 和柱,並利用高效液相色譜法做了全麵的驗證,在標準條件下,均能滿足檢測要求。
T-2毒素免疫親(qin) 和柱測定的基礎是抗原抗體(ti) 反應,抗T-2毒素的單克隆抗體(ti) 連接在柱內(nei) 凝膠介質上,樣品中的T-2毒素經過提取、過濾、稀釋,然後將樣品提取液緩慢通過T-2毒素免疫親(qin) 和柱,在免疫親(qin) 和柱內(nei) ,T-2毒素與(yu) 抗體(ti) 結合,洗滌液通過免疫親(qin) 和柱除去未被結合的雜質。最後采用甲醇洗脫T-2毒素,然後進行相關(guan) 分析。
親(qin) 和柱活化→上樣→淋洗→洗脫
活化:3mL柱管上方堵頭直接連接20mL針筒固定後使用,棄去保存液;
上樣:準確移取上述混勻濾液,注入針筒中,調節針筒壓力使其以2秒/滴的速度緩慢通過免疫親(qin) 和柱,棄去;
淋洗:用20mL水衝(chong) 洗柱子,流速1秒/滴,棄去流出液,直至2~3mL空氣通過柱體(ti) ,保證柱子內(nei) 沒有殘餘(yu) 液體(ti) ;
洗脫:用3mL甲醇洗脫並收集洗脫液於(yu) 15mL 離心管中。50℃水浴氮氣吹幹洗脫液。用75%乙腈水溶液定容至1mL,過0.22μm有機濾膜,上機檢。

色譜條件:
色譜柱:月旭Boltimate® C18,2.1×100mm,2.7μm。
流動相:流動相A:10mmol/L 乙酸銨溶液 流動相B:甲醇;
流速:0.2mL/min;
柱溫:30℃;
進樣量:2μL;
運行梯度:

質譜條件:
離子源:ESI;
檢測方式:MRM;
幹燥氣:氮氣,450℃,流速:1000L/Hr;
碰撞氣:氬氣;
離子噴霧電壓:1.0kV。

Welchrom® T-2毒素免疫親(qin) 和柱在《GB 5009.118-2016 食品安全國家標準 食品中T-2毒素的測定》標準下測試,樣品加標回收率達到95.7%,滿足實驗要求。

