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穩定的pH環境在HPLC檢測中的重要性
更新時間:2022-09-15 點擊次數:1052
在液相色譜中,經常會(hui) 在流動相中加入緩衝(chong) 溶液,其目的之一就是使整個(ge) HPLC係充處理一個(ge) 穩定的化學環境,從(cong) 而使檢測具有更好的重現性。若係統的pH不夠穩定,則會(hui) 出現保留時間漂移,多次檢測保留時間不能重現,多組分出峰順序,峰組成不一致等等的各種問題。
特別是酸堿性成分的檢測,pH值對其保留與(yu) 峰型都有很大的影響,因此,這些成分檢測時,HPLC係統的pH穩定性就非常的重要,需在流動相中加入相應的緩衝(chong) 鹽來保持係統的穩定性。例如我們(men) 平常使用的鹽例如磷酸在1.5-3.5的pH範圍內(nei) ,有比較好的緩衝(chong) 能力。
實例:
某成分原流動相僅(jin) 使用冰醋酸調節pH值,但並未加緩衝(chong) 鹽體(ti) 係,因HPLC係統的pH值不夠穩定,而導致的樣品檢測時某一個(ge) 峰產(chan) 生漂移,多次實驗,結果不能重現的問題。
圖1:流動相中沒有緩衝(chong) 溶液,係統pH值不穩定
在這個(ge) 實例中,原流動相沒有緩衝(chong) 能力,pH值不穩定,將流動相替換成鹽後,能提供穩定的緩衝(chong) 能力,使各個(ge) 物質到達較滿意的分離,並具有比較好的重現性。
圖2:在流動相中加入緩衝(chong) 鹽,使係統pH保持穩定