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色譜柱填料汙染原因剖析及解決方案
更新時間:2022-09-05 點擊次數:1305
在色譜柱使用過程中,會(hui) 出現柱壓高,峰形差等現象,其主要原因是色譜柱填料汙染導致的,下麵將對色譜柱填料汙染進行原因剖析及解決(jue) 方案。
1)中藥類樣品成分複雜,如前處理過於(yu) 簡單,就很容易引起強保留成分積留在色譜柱入口端,導致色譜柱壓力升高,柱效下降,峰型異常,或在色譜圖中出現“鬼峰"。
2)蛋白類樣品累積:生物類樣品易在柱頭端累積,導致柱壓升高,柱效下降。
3)其他:如膠狀,絮狀等樣品通過過濾無法去除,也會(hui) 積壓在篩板和柱頭端,引起柱壓升高。
1)在方法開發時,就盡量采用SPE小柱、萃取等方法盡量多去除一些雜質。
2)使用保護柱,需要注意的是,保護柱的柱芯為(wei) 耗材,不能長期使用不更換,一旦超過柱芯的保護能力,強保留物質還是會(hui) 進入色譜柱,因此,要關(guan) 注柱壓,柱壓提高10%以上就建議更換柱芯。
3)對於(yu) 檢測中藥複雜成分的柱子,建議定期按色譜柱說明書(shu) 的異常再生方法進行色譜柱維護,目的是定期的去用洗脫能力較強的乙腈,異丙醇去反向衝(chong) 洗色譜柱,去除柱頭端的強保留物質。
4)如檢測這類產(chan) 品的色譜柱出現超壓,柱效不符合等情況,建議客戶先按說明書(shu) 的異常再生方法進行處理。如還是不能解決(jue) ,再按公司的有關(guan) 規定,申請維修。
1)使用SPE等更加有效的前處理方法。
2)定期進行色譜柱維護衝(chong) 洗,推薦去除蛋白溶劑(乙腈-水-三氟yi酸 = 50-50-0.1)。
3)使用保護柱。
4)因這類原因,柱子一旦出現柱壓升高,柱效下降的情況,維修後能恢複的可能性很小,所以建議客戶在使用過程中去定期維護,並加保護柱。
如膠狀,絮狀等樣品通過過濾無法去除,也會(hui) 積壓在篩板和柱頭端,引起柱壓升高。這一類,最好在樣品處理或工藝上去解決(jue) 。