【幹貨分享】色譜定量方法介紹

色譜分析的重要作用之一是對樣品進行定量，色譜定量的依據是：組分的重量或濃度與(yu) 檢測器的響應信號成正比。選擇合適的定量方法時，除需要考慮相對定量還是絕對定量外，同時也需要考察化合物的線性響應範圍、是否有合適內(nei) 標、是否有標準品等。常見的定量方法有內(nei) 標法、外標法、麵積歸一法、加校正因子的主成分自身對照法與(yu) 不加校正因子的主成分自身對照法等。本文將對zui常用的內(nei) 標法、外標法、麵積歸一法三種方法進行介紹。

內(nei) 標法是將一定重量的純物質作為(wei) 內(nei) 標物加到一定量的被分析樣品混合物中，根據測試樣和內(nei) 標物的質量比及其相應的色譜峰麵積之比及相對校正因子，來計算被測組分的含量。

精密稱（量）取對照品和內(nei) 標物質，分別配成溶液，各精密量取適量，混合配成校正因子測定用的對照溶液。取一定量進樣，測量對照品和內(nei) 標物質的峰麵積，計算校正因子。

再取按標準製備中含內(nei) 標物質的供試品溶液，進樣，測量供試品中待測成分和內(nei) 標物質的峰麵積，再計算含量（其中Ax：供試品圖中待測成份峰麵積；A`S: 供試品圖中內(nei) 標物峰麵積；C`S：供試品圖中內(nei) 標物濃度）。

外標法是用待測組分的純品作對照物質，以對照物質和樣品中待測組分的響應信號相比較進行定量的方法。它不是把標準物質加入到被測樣品中，而是在與(yu) 被測樣品相同的色譜條件下單獨測定，把得到的色譜峰麵積與(yu) 被測組分的色譜峰麵積進行比較求得被測組分的含量。此法可分為(wei) 外標一點法與(yu) 標準曲線法。

如標準中有係統適用性要求，首先需確認係統溶液能滿足條件，否則檢測無效。一般要求對照品配製兩(liang) 份，一份連續進5針以計算RSD，如無特殊要求，RSD不超過2%。符合了，說明係統沒問題，再進行後麵的實驗。樣品也同樣需要配製兩(liang) 份，兩(liang) 份樣品最終結果的RSD同樣不能超過2.0%。

由於(yu) 組分的量與(yu) 其峰麵積成正比，按各品種項下的規定，配製供試品溶液，取一定量進樣並記錄色譜圖，測得各峰的峰麵積和色譜圖上除溶劑峰以外的總色譜峰麵積，計算各峰麵積占總峰麵積的百分比。

計算公式：

總雜（%）=1-主成分峰麵積百分比

單雜峰直接從(cong) 積分結果表中讀取即可

此法結果很不準確，一般在工藝研究、原料合成過程中的中間體(ti) 等中用來檢測大致數據做參考用。