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高效液相色譜日常維護要點-衝洗
更新時間:2022-05-31 點擊次數:3171
哈嘍哈嘍大家好,小編又來了。之前小編已經帶大家詳細了解了脫氣和過濾的基本原理和一些日常處理方法,今天就帶大家來了解一下高效液相色譜日常維護最後一個(ge) 要點-衝(chong) 洗。
相信各位老師一定深有感觸,要使HPLC係統能夠良好運行的第三個(ge) 要點是保持液相係統的清潔。日常使用時,我們(men) 需要關(guan) 注流動相流經該係統的所有地方,一般都是建議對儲(chu) 液瓶,泵,自動進樣器,色譜柱,檢測器這些地方做經常性的衝(chong) 洗,這樣將會(hui) 使你的係統隨時保持最佳狀態。
首先流動相應根據用量合理配置,建議最好是現配現用。其次的話要經常清洗流動相儲(chu) 液瓶,最好是更換一次流動相衝(chong) 洗一次儲(chu) 液瓶。
我們(men) 又可以分為(wei) 幾種不同衝(chong) 洗方式。
一般清洗:直接用純化水衝(chong) 洗。適用於(yu) 盛裝純甲醇、純乙腈的貯存。
正常清洗:加入適量洗潔精,用毛刷刷洗;之後用純化水衝(chong) 洗幹淨。
幹淨的標準:水不成股流下,也不掛壁。適用於(yu) 盛裝含有緩衝(chong) 鹽或無機酸等流動相的貯存瓶。
重點清洗:先用稀硝酸或鉻酸洗液潤洗,再用正常清洗項下的方法清洗。適用於(yu) 有可能長黴的貯存瓶清洗,如夏天存放含大比例無機相的瓶子,以及存放流動相時間超過15天的瓶子。
清洗幹淨標準除正常清洗項下規定外,同時用pH試紙測定,使其達到中性(純化水的pH值)。一定要保證最後的瓶子流出的水為(wei) 中性,否則可能會(hui) 對液相色譜儀(yi) 或色譜柱造成損壞。
接下來要衝(chong) 洗的是泵。特別是當流動相中含有難揮發的緩衝(chong) 液(如磷酸鹽)時。如果儀(yi) 器不是連續使用,當流動相蒸發時, 難揮發物就會(hui) 粘在活塞密封墊的表麵,難揮發物將形成固形物沉澱。這是泵密封墊磨損和單向閥滲漏的主要原因之一。
所以,無論使用長短,在停泵以前一定要用非緩衝(chong) 液流動相衝(chong) 洗泵在半個(ge) 小時以上,要是流動相中有難揮發緩衝(chong) 鹽則建議衝(chong) 洗的時間應該更長些。
針對管路的衝(chong) 洗,如果以常規有機相試劑作為(wei) 流動相的係統,建議每次實驗完成後,用高比例有機相衝(chong) 洗係統90分鍾以上(90%的甲醇水溶液,或者用90%乙腈水溶液)。
如果流動相中含有酸堿鹽的的係統,建議先斷開保護柱和色譜柱,用純水衝(chong) 洗泵和進樣器管路30分鍾(流速1.0mL/min),衝(chong) 洗過程中應保證進樣器分別在load和inject狀態各衝(chong) 洗15min,之後應進行過渡,首先用高比例水相(10%甲醇水溶液,或者用50%乙腈水溶液)過渡係統90分鍾,之後再用常規有機相試劑作為(wei) 流動相係統方法衝(chong) 洗。
自動進樣器也要按規定清洗。現在的儀(yi) 器多配有自動進樣器的衝(chong) 洗液瓶,通常隻要注意及時更換、補充衝(chong) 洗液即可。
色譜柱的汙染也會(hui) 隨使用時間而增加。通常表現是:色譜柱壓升高,峰形異常,柱效下降,分離度異常等。
預防這個(ge) 問題的zui有效方法:在每一批樣品分析結束後或準備卸下柱子時,將我們(men) 的色譜柱按照對應的說明書(shu) 做好日常維護工作。
針對檢測器的衝(chong) 洗,可以依據檢測器其性質並按照說明書(shu) 規定進行洗。例如UV/VIS檢測器或FL檢測器,在對柱子和係統進行衝(chong) 洗時也就一同對檢測器流通池中汙染物進行了清洗。但是蒸發光檢測器或質譜儀(yi) 則需要按照說明書(shu) 進行定期清洗。這些檢測器在使用時會(hui) 有難揮發汙染物沉積,如質譜儀(yi) 離子源的噴針、毛細管、錐孔板、預四極等部件,因而需要定期清洗。
到此,針對高效液相色譜日常維護要點就給大家介紹的差不到了,如果想要實驗室日常使用的液相色譜儀(yi) 能夠正常高效的運行,以上日常維護都是必bu可少的。