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混合模式分離,選擇性有多*?

更新時間:2022-05-12 點擊次數:1242

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混合模式色譜柱可被認為(wei) 是疏水性的離子交換劑——相對於(yu) 親(qin) 水性更強的用於(yu) 傳(chuan) 統的IEC(離子交換色譜)色譜柱。常用的混合鍵合相有三種模式:反相/陰離子交換、反相/陽離子交換、反相/兩(liang) 性物質。結果是這類色譜柱同時表現出RPC(反相色譜)和IEC的行為(wei) 。使用混合模式的起因是,與(yu) RPC或IEC柱相比,他們(men) 具有*的選擇性。


混合鍵合相的優(you) 勢有:

1

高選擇性,可提供與(yu) 反相及離子交換不同的選擇性;

2

流動相無需使用離子對試劑即可分離強極性物質;

3

可以同時分析分離不同類型的化合物(帶正電、負電和中性物質);

4

可直接進行質譜分析。

混合模式分離的保留行為(wei) 能通過改變B%、pH、緩衝(chong) 鹽或鹽的濃度控製。

月旭現有的混合模式色譜柱有:

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Ultimate® NH2/CN鍵合相,新柱的保存溶劑是正己烷-異丙醇。當作為(wei) 反相模式使用時:做樣流動相中含有甲醇、乙腈、水等極性溶劑,活化方式如下:


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當作為(wei) 正相模式使用時:做樣流動相中含有正己烷、異丙醇等弱極性溶劑,活化方式如下:

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日常維護和保存(建議反衝(chong) ):

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當色譜柱使用一段時間後,出現壓力升高、峰形異常、柱效降低、分離度下降等異常情形時,先用過渡流動相衝(chong) 洗掉色譜柱中的緩衝(chong) 鹽,再按照如下方式衝(chong) 洗(建議反衝(chong) ):

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Ultimate® C18/SCX、Ultimate® SCX/C18鍵合相,新柱的保存溶劑是甲醇/水。活化方式如下:


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日常維護和保存(建議反衝(chong) ):

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當色譜柱出現柱壓升高、峰形異常、柱效降低、分離度下降等異常後,先使用過渡流動相衝(chong) 洗掉色譜柱中的緩衝(chong) 鹽,再按照如下方式衝(chong) 洗,其中,如果流動相中使用了離子對試劑,需先用50%甲醇衝(chong) 洗後,再按照下表衝(chong) 洗(建議反衝(chong) ):

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