What？又是方法重現性！（下篇）

當溶劑與(yu) 流動相起始有機相比例有差異時，在不同儀(yi) 器上會(hui) 呈現出不同的檢測效果。

圖中為(wei) 同一個(ge) 項目在兩(liang) 台不同儀(yi) 器上的檢測效果。該項目的溶劑為(wei) 50%乙腈，流動相起始比例為(wei) 25%乙腈。圖1為(wei) 在柱前管路內(nei) 徑較大的儀(yi) 器上的效果圖，圖2為(wei) 內(nei) 徑管理較細的儀(yi) 器上的效果圖。較大的管路內(nei) 徑使樣品在進柱子前得到充分的混合，消除了溶劑效應，呈現比較好的峰型。這種有溶劑效應的項目，可以通過使用較粗的管線的儀(yi) 器，或降低進樣量的方法來解決(jue) ，當然，更加保險的方法就是把樣品溶劑更換後與(yu) 初始流動相極性更為(wei) 接近的溶劑。

進樣量過大，進樣閥-色譜柱-檢測器之間、檢測池、接頭體(ti) 積大，都會(hui) 引起柱外效應，導致峰型異常。因此，這類樣品，在方法中需對儀(yi) 器的要求更加詳細。

緩衝(chong) 液選擇不正確，如緩衝(chong) 鹽濃度太低、超出有效的緩衝(chong) pH值範圍，都可能導致重現性不好的情況。有些對pH值特別敏感的樣品，流動相的pH值的細微變化都會(hui) 導致無法重現。這類樣品，在緩衝(chong) 液選型時應特別注意緩衝(chong) 的的緩衝(chong) 範圍和濃度，以保證流動相體(ti) 係能給樣品檢測提供一個(ge) 穩定的pH值。

有些樣品對有機相的變化特別敏感，這類樣品，建議流動相選擇在線混合。

很多樣品都會(hui) 因柱溫變化而產(chan) 生不同的選擇性。因此，如果不用柱溫進行控製，會(hui) 導致樣品因柱溫的變化而產(chan) 生重現性問題。建議在方法開發時，對柱溫進行±10℃溫度 的耐用性進行驗證，如對柱溫變化敏感的，應把檢測柱溫列入方法。

此外，還有柱平衡慢，柱超載、儀(yi) 器故障等問題也會(hui) 造成方法無法重現。