嘔吐毒素的危害與檢測

嘔吐毒素(vomitoxin)，又稱脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(DON)，化學名為(wei) 3α, 7α, 15一三羥基草鐮孢菌-9-烯-8-酮，屬於(yu) 單端孢黴烯族化合物，主要由禾穀鐮刀菌、尖孢鐮刀菌、串珠鐮刀菌、擬枝孢鐮刀菌、粉紅鐮刀菌、雪腐鐮刀菌等鐮刀菌產(chan) 生。另外，頭孢菌屬、漆班菌屬、木黴屬等的菌株都可產(chan) 生該毒素。單端孢黴烯族毒素共有150多種，是一類強有力免疫抑製劑，所引起典型症狀是采食量降低，所以這類毒素又叫飼料拒食毒素。嘔吐毒素是其中最重要一種毒素，主要來自鐮刀菌屬，尤其是禾穀鐮刀菌和黃色鐮刀菌由於(yu) 它可以引起豬的嘔吐，故又名嘔吐毒素。

嘔吐毒素被列為(wei) 3類致癌物。它們(men) 具有很高的細胞毒素及免疫抑製性質，因此，對人類及動物的健康構成了威脅，特別是對免疫功能具有明顯的影響。DON廣泛存在於(yu) 全球，主要汙染小麥、大麥、玉米等穀類作物，也汙染糧食製品，當人攝入了被DON汙染的食物後，會(hui) 導致厭食、嘔吐、腹瀉、發燒、站立不穩、反應遲鈍等急性中毒症狀，嚴(yan) 重時損害造血係統造成死亡。由於(yu) 中國傳(chuan) 統飲食習(xi) 慣中糧穀比例大大高於(yu) 西方，使得嘔吐毒素的危害更為(wei) 突出。穀物及飼料中DON的含量有嚴(yan) 格的*。我國穀物中DON的*為(wei) 1.0 mg/kg。

我國用於(yu) 檢測嘔吐毒素的液相色譜法，常常會(hui) 利用嘔吐毒素（脫氧雪腐鐮刀菌烯醇）免疫親(qin) 和柱，免疫親(qin) 和柱可選擇性吸附樣品液中的脫氧雪腐鐮刀菌烯醇，從(cong) 而對脫氧雪腐鐮刀菌烯醇起到非常針對性的純化作用。

利用抗原抗體(ti) 反應，抗體(ti) 連接在柱體(ti) 內(nei) ，樣品經過提取、過濾後，緩慢的通過脫氧雪腐鐮刀菌烯酵免疫親(qin) 和層析柱，在免疫親(qin) 和柱內(nei) 毒素與(yu) 抗體(ti) 結合，之後洗滌免疫親(qin) 和柱除去沒有被結合的其他無關(guan) 物質，再用甲醇洗脫，然後用於(yu) 檢測。過淨化柱後可直接用於(yu) 液相脫氧雪腐鐮刀菌烯醇含量的檢測，可提高檢測方法的準確度，達到快速測定的目的。

參考標準《GB 5009.111-2016 食品安全國家標準 食品中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的測定》 ，月旭嘔吐毒素(脫氧雪腐鐮刀菌烯醇) DON免疫親(qin) 和柱完成符合標準要求。以麵粉為(wei) 樣品，采用月旭嘔吐毒素(脫氧雪腐鐮刀菌烯醇) DON免疫親(qin) 和柱淨化，然後進行檢測。

回溫：將免疫親(qin) 和柱從(cong) 低溫條件下取出後，恢複至室溫，將柱內(nei) 液體(ti) 放出；

上樣：待淨化液全部上樣，棄去；

淋洗：5mL磷酸鹽緩衝(chong) 液，5mL水，棄去，抽幹柱子；

洗脫：加入2mL甲醇洗脫，抽幹柱子；

濃縮：將洗脫液置於(yu) 50℃水浴中氮吹至幹，用20%甲醇水定容至1mL，用0.22μm濾膜過濾，上機測定。

色譜柱：月旭Ultimate^® XB-C18 4.6×150mm，5μm；

流動相：水：甲醇(80:20)；

流速：1.0mL/min；

柱溫：30℃；

進樣量：20μL；

波長：218nm 。

回收率結果如下圖：

圖一：麵粉樣品空白圖譜