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What?又是方法重現性!(上篇)
更新時間:2022-03-28 點擊次數:1074

在方法開發工作中,經常會(hui) 碰到驗證時方法無法重現的情況,而這種時候,很多人會(hui) 把這個(ge) “錯"歸到色譜柱上。確實,有極少數的“超敏體(ti) 質"項目,會(hui) 對色譜柱的內(nei) 環境極度敏感導致無法重現。但大部分無法重現卻是其他原因造成的,今天,我們(men) 就來說一說這些其他原因。
這種問題經常出現在使用檢測過其他項目的色譜柱進行方法開發,再換色譜柱進行重現時發生。這種情況是因為(wei) ,有些特殊物質(可能是樣品中的微量雜質或強保留物質)會(hui) 吸附在填料上無法洗脫下來,這種情況就會(hui) 對色譜柱造成改性。在檢某些特定成分時,會(hui) 影響成份的保留能力,導致更換色譜柱後無法重現分離效果。避免這種情況zuihao的辦法就是方法確定後馬上用新色譜柱進行結果重現。如新柱無法重現結果,就有很大的可能是舊柱子被改性引起的。
有時,使用沒有測過其他項目的色譜柱進行方法開發,後麵重現的時候,也會(hui) 發生更換柱子無法重現的情況。這是因為(wei) ,方法開發過程中會(hui) 使用到很多的不同條件及不同前處理方法處理的樣品,這種情況,也可能使色譜柱改性。因此,哪怕是用沒做過其他項目的色譜柱進行方法開發的,方法確定後,也需用全新的色譜柱進行重現。
色譜柱使用極限條件(如高pH值,高溫,低pH值等),導致色譜柱受損,在這種色譜柱上開發的方法,在更換新柱時,也經常會(hui) 出現無法重現的情況。高pH值會(hui) 引起矽膠溶解,色譜柱塌陷;低pH值會(hui) 導致鍵合相容易脫落,高溫會(hui) 導致填料塌陷,板結等情況,使色譜柱的保留能力發生變化。因此,使用這種條件的方法,方法確定後,一定要用新的色譜柱進行重現。
色譜柱使用過含離子對試劑的條件,離子對試劑會(hui) 使色譜柱改性,無法*衝(chong) 洗幹淨,因此,使用過離子對試劑的色譜柱建議專(zhuan) 柱專(zhuan) 用。
具體(ti) 的原因,我們(men) 將在下篇繼續為(wei) 您解答!未完待續~