離子交換色譜模式，你了解嗎？

相信小夥(huo) 伴們(men) 在日常樣品前處理中也接觸過各種各樣的離子交換SPE柱，像WAX（弱陰離子交換模式）、SAX（強陰離子交換模式）、WCX（弱陽離子交換模式）、SCX（強陽離子交換模式）。

離子交換模式也應用到液相色譜中的，那離子交換色譜模式（IEC）的作用機理是什麽(me) ，有哪些應用，作為(wei) 星空体育全站使用時又有哪些注意事項，今天小編就和大家分享一下。

IEC分離是通過離子化或可離子化的基團與(yu) 色譜柱的固定相表麵接觸而實現的。比如說，用於(yu) 保留質子化的堿（BH⁺）的陽離子交換柱可能含有電荷相反的磺酸基-SO₃-、羧基-COO^-，而用於(yu) 保留離子化的酸（A^-）的陰離子交換柱可能含有季銨基-N(CH₃)₃⁺、氨基-NH₂⁺。在IEC中，樣品保留取決(jue) 於(yu) 樣品離子和流動相反離子相互競爭(zheng) 固定相上帶相反電荷的離子基團的結果。

保留原理可用如下關(guan) 係式表示：

當為(wei) 陽離子交換模式時

X^+m+m(R^-Y⁺)  ⇔ X^+mR_m-+mY⁺

X^+m ----  陽離子溶質

Y⁺    ---- 流動相反離子

R^-    ---- 附著在色譜柱填料上的陰離子基團（如-SO₃^-、-COO^-）

當為(wei) 陰離子交換模式時

X^-m+m(R⁺Y^-)  ⇔ X^-mRm⁺+mY^-

X^-m ---- 陰離子溶質

Y^-    ---- 流動相反離子

R⁺   ---- 附著在色譜柱填料上的陰離子基團（如-N(CH₃)3^+-、-NH₂+）

不同的流動相反離子或多或少通過離子交換被固定相強烈的保留，因此，改變反離子可用於(yu) 增加或減少溶劑的強度以及樣品的保留值。一般而言，反離子所帶的電荷數越高，對於(yu) 減少樣品保留就越有效。

不同離子的結合強度、抑製樣品保留和提供較小k值的相對能力按以下順序排列：

陰離子交換

F^-（使溶質的k值較大）<OH^-<醋酸鹽<Cl^-<SCN^-<Br^-<NO₃^-<I^-<草酸鹽^2-<SO₃^2-<枸櫞酸鹽^3-（使溶質的k值較小）

陽離子交換

Li⁺（使溶質的k值較大）

<H⁺<Na⁺<NH₄⁺<K⁺<Rb⁺<Cs⁺<Ag⁺<Mg²⁺<Zn²⁺<Co²⁺<Cu²⁺<Cd²⁺<Ni²⁺<Ca²⁺<Pb²⁺<Ba²⁺（使溶質的k值較小）

IEC通常用於(yu) 分析酸性或堿性樣品，而流動相的pH對IEC模式的影響與(yu) RPC模式相反。例如，降低流動相的pH，會(hui) 使酸性物質從(cong) 全電離變為(wei) 半電離，k值會(hui) 隨之減少一半，類似的，堿性物質的的電離和保留會(hui) 隨著流動相pH的升高而降低。

離子交換色譜柱是一種重要的分離技術，其常見應用包括：

1. 無機離子混合物（離子色譜柱）；

2. 生物分子，包括氨基酸、多肽、蛋白質、核酸，特別是寡核苷酸；

3. 碳水化合物；

4. 羧酸類化合物等。

目前月旭的離子交換色譜柱

Ultimate^® “極限"離子交換係列色譜柱:

離子交換色譜柱的注意事項

1. 離子交換色譜柱的平衡時間相對C18柱而言時間較長；

2. 離子交換色譜柱能與(yu) 水和有機試劑兼容，可用甲醇、乙腈、水（包括緩衝(chong) 鹽溶液）作為(wei) 流動相；

3. 陽離子交換柱常用於(yu) 分析在水溶液中呈陽離子態的化合物，陰離子交換柱常用於(yu) 分析在水溶液中呈陰離子態的化合物；

4. 離子化合物的保留能力與(yu) 流動相的pH、離子強度、流動相中有機相比例及溫度有關(guan) 。通常離子強度越大保留時間越短。對於(yu) 陽離子化合物，流動相中有機相比例越大，保留時間時間越短，而陰離子化合物，有機相比例越大保留時間越長；

5. 檸檬酸鹽和磷酸鹽等緩衝(chong) 溶液通常用於(yu) 調整流動相的pH和離子強度以改善分離度。流動相的pH應該維持在2.0~7.5之間。緩衝(chong) 鹽濃度不建議超過100mM，否則會(hui) 鹽析堵塞色譜柱；

6. 離子交換類色譜柱，當出現分離度下降、保留時間漂移等情況時，當出現這類情況時，可以將用10%甲醇水衝(chong) 洗至少20倍柱體(ti) 積再測試；

7. 色譜柱存放時間過長也易造成鍵合相脫落，建議有條件的可以隔段時間拿出來衝(chong) 洗下，確保鍵合相處於(yu) 活性狀態。