HILIC親水作用模式知多少？

小夥(huo) 伴們(men) 平時使用最多的就是反相色譜柱（RPC）和正相色譜柱（NPC），當我們(men) 遇到化合物在正相模式下強保留，在反相模式下不保留或保留很弱的情況時該怎麽(me) 選擇色譜柱呢？

相信小夥(huo) 伴們(men) 的第一反應是用HILIC色譜柱，那今天小編就和大家分享一下親(qin) 水模式色譜柱的作用機理和日常維護，希望對大家有所幫助。

HILIC柱也叫親(qin) 水作用色譜柱，是正相色譜柱的一種變化，即固定相是極性填料，使用的流動相是甲醇、乙腈、水等極性溶劑。極性物質在親(qin) 水作用色譜裏優(you) 先被保留，這意味著很多在反相色譜裏保留很弱的物質可以使用親(qin) 水作用色譜分離。

親(qin) 水模式色譜常見的固定相鍵合類型有：純矽膠、氰基、二醇基、酰胺基和兩(liang) 性離子等。

在HILIC模式下，溶劑極性順序：水>甲醇>乙醇>異丙醇>乙腈>丙酮，在此模式下不建議同時使用水和甲醇作為(wei) 流動相，因為(wei) 這兩(liang) 種溶劑的洗脫能力強。

HILIC模式的保留機理綜合了液液分配、離子交換作用和氫鍵作用，具體(ti) 如下：

//溶質分子首先在主體(ti) 流動相與(yu) 色譜填料表麵的半固定的高極性水膜之間發生液液分配；

//次級保留作用包括色譜填料表麵矽醇基和/或極性官能團與(yu) 帶電分析物間發生的離子交換作用；

//氫鍵作用發生在帶正電的分析物與(yu) 帶負電的表麵矽醇基之間。

其主要應用包括：

1、分離在反相色譜上不保留或保留較弱的化合物；

2、分離正相模式下強保留化合物。

新柱是保存在純乙腈中的，所以小夥(huo) 伴們(men) 拿到色譜柱後需先用純乙腈低流速活化後再使用（若測試方法中使用了含緩衝(chong) 鹽的流動相，先用70%乙腈水過渡）。

HILIC係列色譜柱的日常維護和保存（建議反衝(chong) ）：

當色譜柱使用一段時間後，出現壓力升高、峰形異常、柱效降低、分離度下降等異常情形時，先用過渡流動相（70%乙腈）衝(chong) 洗掉色譜柱中的緩衝(chong) 鹽，再按照如下方式衝(chong) 洗（建議反衝(chong) ）：

HILIC Amide柱、HILIC-NH₂柱、HILIC-Silica柱