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反相離子對試劑什麽時候使用?
更新時間:2021-11-11 點擊次數:2432
在介紹反相離子對試劑之前,我們(men) 先回憶一下離子對色譜法(Ion-pair chromatography,IPC),離子對色譜法可被看作是以分離離子樣品為(wei) 目的的反相色譜法(Reversed-phase chromatography,RPC)的改良形式。IPC與(yu) RPC唯yi不同的條件是IPC在流動相中添加了離子對試劑,這些試劑能在平衡過程與(yu) 酸性化合物的A-或者堿性化合物的BH+發生相互作用。

離子對試劑是由強親(qin) 水離子形成,反作用於(yu) 樣品分子的中性離子對。因此,可用於(yu) 同時分離帶電分子和非帶電分子。反相離子對色譜法是把離子對試劑加入到含水流動相中,被分析的組分離子在流動相中與(yu) 離子對試劑的反離子生成不帶電荷的中性離子,從(cong) 而增加溶質與(yu) 非極性固定相的作用,使分配係數增加,改善分離效果。
一般情況下,在建立HPLC分離方法的時候,我們(men) 推薦由RPC開始,接著添加離子對試劑(僅(jin) 當有需要時)。舉(ju) 個(ge) 例子,當我們(men) 已知某個(ge) 峰是對應一個(ge) 酸性物質、堿性物質或中性物質時,我們(men) 便能準確地預測出添加的IPC試劑對溶質保留的影響。因此,當改變RPC的其他條件仍不能達到合適的分離度時,我們(men) 可以通過使用IPC試劑不斷改變酸性溶質和堿性溶質的保留行為(wei) 從(cong) 而改善他們(men) 的分離效果。
那麽(me) ,IPC在什麽(me) 時候或者應用於(yu) 什麽(me) 物質的分離會(hui) 是比較合適的分離方法呢?在樣品出現以下特點時我們(men) 就可以考慮使用離子對試劑:
(1)在反相色譜柱上不保留或保留弱;
(2)化合物帶有強離子官能團,如羧基、銨基、氨基等;
(3)化合物在反相體(ti) 係流動相中有足夠的溶解度。
使用離子色譜法可令樣品的保留行為(wei) 產(chan) 生類似於(yu) 改變流動相的pH的變化,但是離子對色譜法能更好的控製酸性溶質或堿性溶質的保留行為(wei) ,而且無須使用ji端的流動相pH(如,pH<2.5或pH>8.0)。
常見的離子對試劑主要包括如下幾類:
陰離子對試劑:四丁基氫氧化銨、四丁基溴化銨等堿性試劑,適用於(yu) 結構式中含磺酸基、羧基等的極性化合物。
陽離子對試劑:甲烷磺酸鈉、戊烷磺酸鈉、己烷磺酸鈉、庚烷磺酸鈉、辛烷磺酸鈉、癸烷磺酸鈉、十二烷基磺酸鈉、十二烷基硫酸鈉等,適用於(yu) 結構式中含銨基、氨基等的極性化合物。
其他離子對試劑:高氯酸鈉、三氟yi酸、七氟丁酸等。