絲氨酸蛋白酶 純化方案
更新時間:2021-10-13 點擊次數:1882
絲(si) 氨酸蛋白酶是一種種類豐(feng) 富的酶類,之所以以此命名是因為(wei) 在酶的催化活性位點上包含絲(si) 氨酸在內(nei) 的絲(si) 氨酸、組氨酸、天冬氨酸組成的催化三聯體(ti) 。有些絲(si) 氨酸蛋白酶類如凝血酶類蛋白酶,其中包括凝血酶、組織纖維蛋白溶酶原激活劑、血纖維蛋白溶酶,它們(men) 參與(yu) 凝血的發生以及炎症應答反應;也有些如胰蛋白酶類的絲(si) 氨酸蛋白酶類的參與(yu) 消化的酶類,包括胰蛋白酶、彈性蛋白酶、胰凝乳蛋白酶;還有一些表達在神經係統中的絲(si) 氨酸蛋白酶類,這些酶類與(yu) 神經係統正常的維持或是介導病理情況的發生。
對氨基苯甲脒既是重要的化工原料、藥物中間體(ti) , 又是胰蛋白酶、尿激酶等酶的抑製劑, 它還可以作為(wei) 親(qin) 和色譜法中的配體(ti) 和絲(si) 氨酸蛋白酶活性位置的探針,因而備受關(guan) 注。月旭Benzamidine Tanrose 4FF是將對氨基苯甲脒偶聯到瓊脂糖凝膠上而製成的一種親(qin) 和層析介質,可以用來純化絲(si) 氨酸蛋白酶。
圖 1 月旭 Benzamidine Tanrose 4FF填料
Benzamidine Tanrose 4FF
技術參數
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| 0.05M醋酸鹽緩衝(chong) 液、20%乙醇,pH 4.0 |
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層析柱:PreCot Benzamidine 4FF(5mL預裝柱)。
樣品:胰糜蛋白酶混合物;
結合緩衝(chong) 液:50mM PB,50mM NaCl pH7.0;
洗脫緩衝(chong) 液:0.1M GIy pH 2.7(洗脫液收集管中預先加入200μl 1M Tris-HCl pH9.0);
流速:0.7mL/min。