什麽是色譜柱死體積，您了解嗎？

各位小夥(huo) 伴都聽說過死體(ti) 積吧。死體(ti) 積越大，導致樣品擴散的空間很大，色譜峰會(hui) 更容易展寬，峰形變差。那麽(me) 死體(ti) 積該如何定義(yi) 呢，死體(ti) 積大小如何計算，這裏小編就給各位小夥(huo) 伴做個(ge) 介紹。

死體(ti) 積的定義(yi)

死體(ti) 積狹義(yi) 上指的是色譜柱中未被固定相占據的空隙體(ti) 積，即色譜柱內(nei) 流動相的體(ti) 積。廣義(yi) 上的死體(ti) 積是指進樣位置（進樣口）到檢測位置（檢測器流通池）這一段的體(ti) 積（PS:除去色譜柱中填料體(ti) 積），一旦色譜柱連接，這段體(ti) 積（圖示橙色管路）是不變的（死的）。

HPLC中色譜柱死體(ti) 積該如何計算

對於(yu) HPLC來說，該如何計算死體(ti) 積呢。

死體(ti) 積(dead volume,V0)——由進樣器進樣口到檢測器流動池未被固定相所占據的空間。它包括4部分：進樣器至色譜柱管路體(ti) 積、柱內(nei) 固定相顆粒間隙（被流動相占據，Vm）、柱出口管路體(ti) 積、檢測器流動池體(ti) 積。其中隻有Vm參與(yu) 色譜平衡過程，其它3部分隻起峰擴展作用。為(wei) 防止峰擴展，這3部分體(ti) 積應盡量減小。

死時間(dead time,t0)——不保留組分的保留時間。即流動相（溶劑）通過色譜柱的時間。
測量係統死體(ti) 積通常需要通過實驗進行測量，常用方法是通過進一針和色譜柱固定相沒有任何作用的特殊溶液（方法中會(hui) 有規定，例如：尿嘧啶，少量NaNO3或甲醇溶於(yu) 流動相得到的溶液，也有直接用100％色譜純甲醇進樣的情形）時，就會(hui) 得到一個(ge) 色譜峰，由此峰可以測得死時間（t0），這就是t0的實測結果。

然後通過計算得到係統死體(ti) 積:
死體(ti) 積（V0) = 死時間t0×流動相的流速F。

減小死體(ti) 積的注意事項

在我們(men) 使用或維護的過程中，如果涉及管路等配件的更換，應該選擇與(yu) 原規格一致的配件，以確保死體(ti) 積與(yu) 原來一致，避免死體(ti) 積的增加而帶來峰形的展寬。

接裝色譜柱時，需確保管線接頭匹配完好（特別注意peek管接頭的使用，以及管線與(yu) 色譜柱的連接處）避免形成接頭空腔（如下圖）。

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