背景
葉黃素、玉米黃質、α-胡蘿卜素、β-胡蘿卜素和番茄紅素是天然植物性食品中w常見的5種類胡蘿卜素類營養(yang) 物質,具有維生素A原活性、抗氧化、參與(yu) 細胞傳(chuan) 遞、免疫功能調節與(yu) 促進、保護皮膚免於(yu) 紫外線傷(shang) 害和抑製黃褐斑生成等諸多生理保健功效。
但這5種類胡蘿卜素類營養(yang) 物質的液相色譜同時分離測定一直比較困難,原因是這5種類胡蘿卜素類營養(yang) 物質之間的極性差異比較大,葉黃素和玉米黃質分子結構中有兩(liang) 個(ge) 羥基,極性較強,在反相星空体育全站(如C18等)上的保留力較弱,而α-胡蘿卜素、β-胡蘿卜素和番茄紅素是烴類物質,僅(jin) 由碳和氫兩(liang) 種原子構成,無任何極性官能基團,極性極弱,在反相星空体育全站(如C18等)上的保留力*;另外,更為(wei) 重要是葉黃素和玉米黃質之間,以及α-胡蘿卜素和β-胡蘿卜素之間,兩(liang) 兩(liang) 互為(wei) 同分異構體(ti) ,相互間僅(jin) 是一個(ge) 碳-碳雙鍵的位置差異,液相分離難度大(分子結構詳見附錄A,特征吸收光譜圖詳見附錄B)。
本應用案例采用月旭科技公司生產(chan) 的C30反相高效星空体育全站、兩(liang) 元梯度洗脫,實現了單次高效液相色譜檢測對葉黃素、玉米黃質、α-胡蘿卜素、β-胡蘿卜素和番茄紅素這5種類胡蘿卜素類營養(yang) 物質的分離檢測,且單次高效液相色譜檢測費時為(wei) 35分鍾。
高效液相色譜檢測條件
1 儀(yi) 器設備 Welch 高效液相色譜儀(yi) ,WiSys5000,配備二級管陣列檢測器;
2 星空体育全站
分析柱:Ultimate XB-C30色譜柱,4.6mm×250mm, 5μm;
保護柱:Ultimate XB-C30,4.6mm×10mm, 5μm;
3 流動相 A相:甲醇:乙腈=1:1;B相:乙酸乙酯;
4 梯度洗脫程序

5 流速 1.0mL/min;
6 檢測波長 476nm;
7 柱溫 30℃;
8 進樣體(ti) 積 20μL。
高效液相分離色譜圖

從(cong) 高效液相檢測的色譜圖看,不僅(jin) 單次檢測,35分鍾內(nei) 實現同時分離檢測葉黃素、玉米黃質、α-胡蘿卜素、β-胡蘿卜素和番茄紅素這5種類胡蘿卜素類營養(yang) 物質,而且互為(wei) 同分異構體(ti) 的葉黃素和玉米黃質之間,以及α-胡蘿卜素和β-胡蘿卜素之間,都基本實現了基線分離。
相關(guan) 色譜耗材

附錄A:5種類胡蘿卜素天然營養(yang) 物質的分子結構

附錄B:5種類胡蘿卜素天然營養(yang) 物質的特征吸收光譜圖


