當心，使用流動相注意這些事了嗎

流動相 | 保質期

各位老師知道流動相的保質期有多久嗎，經常遇到有老師前來谘詢“咱們(men) 的流動相能放多久啊，放一星期沒事吧”。但是老師，您知道嗎，流動相放的時間太長，可是會(hui) 直接影響您的實驗結果呢。在這裏就給各位老師說道說道流動相的注意事項。

一：流動相的貯存

流動相一般貯存於(yu) 玻璃、聚四氟乙烯或不鏽鋼容器內(nei) ，不能貯存在塑料容器中。因許多有機溶劑如甲醇、乙酸等可浸出塑料表麵的增塑劑，導致溶劑受汙染。這種被汙染的溶劑如用於(yu) HPLC係統，可能造成柱效降低。貯存容器一定要蓋嚴(yan) ，防止溶劑揮發引起組成變化，也防止氧和二氧化碳溶入流動相。

磷酸鹽、乙酸鹽緩衝(chong) 液很易長黴，應盡量新鮮配製使用，不要貯存。如確需貯存，可在冰箱內(nei) 冷藏，用前應重新濾過。容器應定期清洗，特別是盛水、緩衝(chong) 液和混合溶液的瓶子，以除去底部的雜質沉澱和可能生長的微生物。

二：流動相放置時間的影響

01 有機相揮發：有機試劑組成比例越大，沸點越低，其揮發程度越大，不過對於(yu) 揮發相對比較好控製，隻要密封好就可以；

02 pH值影響：反相色譜流動相往往是緩衝(chong) 鹽，其pH值受有機相的揮發、空氣中的二氧化碳等影響，有時甚至渾濁；且不同pH值及不同緩衝(chong) 鹽其受影響程度不同；

03 微生物影響：水相體(ti) 係時間久了，往往會(hui) 致生微生物，特別受光照等影響，因此，往往在棕色瓶中儲(chu) 存；另外，如果流動相中有機相比例越大，其越不容易致生微生物；所以根據儲(chu) 存條件及有機相比例不同其有效期不同。

所以各位老師要注意了，液相流動相建議12小時以後和瓶子一起更換的，純有機相建議12小時抽濾，24小時以後帶瓶子一起更換。流動相溶液忌微生物超標，各種菌會(hui) 導致柱子堵，而產(chan) 生很多不良影響。我們(men) 都知道，室溫如果高了，純水相上午配的下午下班時候都有可能會(hui) 有微生物繁殖，都需要重新過濾。所以，純水相要現配現用，別抱僥(jiao) 幸心理偷懶不配，結果誤差大的話，隨時可能讓你返工哦。

三：流動相使用前要用過濾和脫氣

流動相使用前用0.45μm濾膜過濾、脫氣，清除微粒和灰塵。在送液泵內(nei) ，為(wei) 了防止雜物（固體(ti) ）進入流路，裝有吸濾器，但網孔徑為(wei) 10μm，比此更小的顆粒仍然可通過，這會(hui) 導致流路和柱子堵塞和汙染。為(wei) 此，建議常用0.45μm濾膜過濾。流動相溶劑須經脫氣，如不脫氣，在溶劑混合時，或壓力溫度變化時容易產(chan) 生大量氣泡，會(hui) 導致泵誤動作和輸液不暢，檢測器產(chan) 生噪聲信號等。

四：流動相需要恢複到室溫下使用

流動相恢複到室溫後使用。流動相溫度與(yu) 室溫相差時，流動相在恢複到室溫前，基線水平很難穩定，特別是發生漂移，也容易產(chan) 生氣泡等現象。水與(yu) 有機溶劑混合時，混合液變化大，往往會(hui) 與(yu) 室溫相差很大，務必注意。

五：避免使用帶有腐蝕性流動相

流動相含有濃硫酸、濃硝酸、二氯乙suan、二氯甲烷、丙酮、四氫呋nan、二甲亞(ya) 碸等溶劑，會(hui) 對流路中的PEEK樹脂管路強度變差、PEEK樹脂管容易破裂使溶劑外濺。流動相含有鹵素離子的溶劑，如KCl、NaCI、NH₄CI等。對流路中的不鏽鋼材料有腐蝕作用，以上的溶劑須盡量避免使用。非用不可時，分析完了後，應立刻用蒸餾水把全流路清洗幹淨。

六：在流動相中加入有機試劑後測量pH值

所謂的pH值，是基於(yu) 水為(wei) 溶劑的體(ti) 係才叫pH值，所以正確的調節緩衝(chong) 溶液pH值的做法是在水溶液中進行。如果添加了有機溶劑後再測量pH值，這其實與(yu) 添加之前測量的pH值會(hui) 有所不同。

然而，重要的一點是操作習(xi) 慣要保持一致。如果習(xi) 慣是在添加有機溶劑之後測量pH值，那隻要確保每次的操作都是如此就可以了。雖然這樣操作不是100%的準確，但至少它與(yu) 之前的做法是一致的。這對於(yu) 一個(ge) 完整的研究來說，相較之你在添加有機溶劑之前測量pH值而獲得了一次準確的數據來說，保持一致的操作方法可能會(hui) 更重要。

七：不要將流動相試劑瓶中的

流動相*用光

假如流動相準備的不夠充足，除了存在一定的泵和色譜柱空運行的風險外，還會(hui) 有其它的問題存在。如由於(yu) 溶液中水會(hui) 從(cong) 試劑瓶的上方蒸發，所以試劑瓶頂部流動相的成分已經發生了改變。如果使用了瓶中後這部分試劑，事實上它們(men) 就是原來試劑瓶中頂部的那部分，當它們(men) 通過色譜柱時可能會(hui) 有渣滓滯留在色譜柱中。

八：使用超聲給流動相脫氣

超聲法對於(yu) 確保所用的緩衝(chong) 鹽*溶解很有效，但它不是z有效的脫氣方法，而且由於(yu) 超聲時溶液會(hui) 快速升溫而導致流動相中有機試劑蒸發。為(wei) 了節省時間，可以花5min時間通過真空過濾機來過濾流動相，這可以一步達到脫氣和過濾的兩(liang) 個(ge) 目的。