幹貨分享∣如何提高固相萃取回收率

小夥(huo) 伴們(men) ，大家好。在先前已經發送的內(nei) 容中，已經為(wei) 大家介紹了SPE原理及相關(guan) 基礎知識。今天小編就和大家一起探討在SPE中影響固相萃取回收率的重要因素。

一個(ge) 樣品的分析過程，包括樣品的采集、分析前的樣品處理、分析、數據處理及結果報告。在這個(ge) 過程中，樣品前處理是繁瑣、花時間的步驟。不僅(jin) 會(hui) 涉及到工作效率的問題，同時，樣品前處理還是影響分析數據精確度和準確度的主要因素之一。SPE技術中萃取回收率衡量著檢測分析結果的準確度，除了分析儀(yi) 器帶來的誤差對回收率的影響之外，在固相萃取中還有以下因素影響著回收率。

根據吸附機理，固相萃取主要分為(wei) 正相保留模式、反相保留模式、離子交換作用模式。

正相保留模式：我們(men) 所使用的溶劑多為(wei) 非極性的有機溶劑，pH對正相保留的影響並不是很大。

反相保留模式：調節pH的主要目的是使目標化合物或者雜質充分質子化，保持分子狀態。以矽膠鍵合十八烷基碳鏈（C18小柱）為(wei) 例，對於(yu) 現在的商品化鍵合矽膠固相萃取小柱，其封尾率多在70%左右，還有30%的矽羥基存在。當化合物處於(yu) 離子狀態時，C18對化合物的容量因子會(hui) 大大降低。

當分析部分堿性化合物時，若萃取環境的pH同時使堿性目標化合物和矽羥基解離帶相反電荷，按照正常的非極性洗脫方法是無法將目標化合物洗脫出來的，因為(wei) 堿性目標物與(yu) 矽羥基之間形成了相反電荷之間的靜電吸引，必然導致回收率降低。當分析部分酸性化合物時，也要注意控製pH，例如，呈離子態的酸性除草劑在C18柱上基本不保留或很少保留。而在萃取前對樣品溶液進行酸化，使其呈中性狀態，就可以提高回收率。

離子交換作用模式：關(guan) 於(yu) pH對離子交換的影響，我們(men) 已經在前期推文“掌握這些固相萃取知識，你就能成為(wei) 實驗室靚的仔”中進行了詳細介紹。

在固相萃取中，流速主要包括：活化流速、控製樣品通過SPE柱的流速和從(cong) SPE柱上洗脫目標化合物的流速。

活化流速：活化主要是使吸附劑填料上官能團充分舒展開來，提高對目標化合物的吸附效率，從(cong) 而提高萃取回收率。此外，還可以除去商品化小柱中可能存在的雜質和幹擾物。對流速的要求是不能太快，一般保持在1mL/min。

樣品通過SPE柱的流速和從(cong) SPE柱上洗脫目標化合物的流速也是兩(liang) 個(ge) 十分重要的因素。從(cong) 下圖可以看出：隨著流速的增加，SPE小柱理論塔板數降低；而且塔板數越高，所受流速的影響越大。

此外，流速過快也有可能造成柱穿透，引起渠道效應。

對於(yu) 樣品通過SPE柱的流速和從(cong) SPE柱上洗脫目標化合物的流速，也建議不超過1mL/min。

SPE小柱中填料的質量影響著其吸附容量，吸附容量指的是在特定條件下，一定質量的吸附劑能夠保留的化合物（包括目標化合物和部分幹擾物）的總質量。常見規格吸附容量如下：

矽膠基質：柱容量不超過SPE填料質量的5%，例如100 mg/1mL的C18小柱可以保留5mg的化合物。

聚合物基質：柱容量是矽膠基質吸附劑的3倍，例如100 mg/1mL的BRP小柱可以保留15mg的化合物。

離子交換吸附劑：交換容量為(wei) 0.25-1mmol/g，1mmol/g表示1g吸附劑能吸附1mmol的一價(jia) 帶電物質。

所以在固相萃取中根據上樣量來選擇合適的柱管規格至關(guan) 重要，當上樣量超過了吸附劑填料的吸附容量，目標化合物就不再被吸附劑所保留，而是會(hui) 隨樣品基質流出SPE小柱，導致回收率下降。

好了，以上是影響SPE回收率的常見因素，希望能夠引起小夥(huo) 伴們(men) 在固相萃取操作中的重視；另外，月旭科技在固相萃取技術產(chan) 品中，已經推出了矽膠基質和聚合物基質的SPE小柱，想了解更多有關(guan) SPE小柱的相關(guan) 信息。