純水色譜柱，耐受原理知一二

哈哈，看到月旭的色譜柱給老師們(men) 解決(jue) 了實驗問題，小編心裏真是很樂(le) 滋滋呢~月旭的AQ色譜柱也是可以耐受100%純水相的色譜柱，對強極性化合物的保留的確很不錯的。那麽(me) 對於(yu) 常見的反相C18色譜柱，能夠耐受100%水相的還有哪些呢？耐受的原理又是如何呢？今天就跟小編一起來了解一下吧~

疏水基團低鍵合密度

我們(men) 都知道，反相C18色譜柱在保留時，水相比例一般不宜大於(yu) 90%，而極性化合物在C18柱上的保留行為(wei) 較弱，有時甚至有機相比例降至5%也沒有很好的保留，但過高比例的水相易使C18鏈發生蜷縮，得不到充分的潤濕和舒展，大大降低C18色譜柱的保留能力。像上麵對話中老師用到的月旭Ultimate® AQ-C18色譜柱，就是通過降低疏水基團（即C18）的鍵合密度，da程度降低C18鏈的坍縮，從(cong) 而大限度地增加極性化合物的保留。月旭Ultimate® AQ -C18色譜柱在高含水量的流動相中，對有機酸、核苷等水溶性強極性化合物具有較好的保留能力。

圖1 Ultimate® AQ-C18色譜柱分離6種有機酸

圖2 Ultimate® AQ-C18色譜柱分離5種核苷酸

側(ce) 鏈基團位阻

普通C18鏈對於(yu) 水相的不耐受還體(ti) 現在高比例水相或鹽相下，鍵合相易受到水分子或鹽分子的作用從(cong) 而造成鍵合相水解脫落。對於(yu) 這一作用，月旭科技的Ultimate® LP-C18則完美的解決(jue) 了該問題。通過在C18烷基側(ce) 鏈引入較大的官能團，其空間立體(ti) 效應阻礙了流動相分子對鍵合相矽氧鍵的作用。同時，由於(yu) Ultimate® LP-C18的未封尾特性，使得該係列色譜柱在酸性條件下（pH可低至0.5）依舊擁有*的耐受能力。

圖3 月旭Ultimate® LP係列色譜柱鍵合相示意圖

封尾工藝

常見的C18色譜柱都是使用*基氯矽烷封尾試劑來對色譜柱進行封尾，而如果使用含有極性官能團，或含有親(qin) 水端基的封尾試劑進行封尾，就能夠很好地改善與(yu) 100%水相的兼容性，同時，由於(yu) 加入了極性親(qin) 水基團，取代了大量的矽醇基位點，在分析堿性化合物的時候能有效防止堿性化合物與(yu) 矽醇基的相互作用，改善峰形。月旭Ultimate®ODS-3色譜柱，月旭Ultimate® ALK-C18色譜柱等，就是采用的該鍵合工藝。

圖4 極性親(qin) 水基團試劑封尾工藝

極性基團嵌入

給色譜柱鍵合相嵌入極性基團的作用原理類似於(yu) 極性基團封尾，區別是極性基團加入的位置是嵌入到C18鏈中。極性嵌入基團有利於(yu) 增加水分子在烷基鏈表麵的濃度，提高對極性化合物的保留，及水相的耐受，例如月旭Ultimate® Polar-RP色譜柱。

圖5 極性嵌入基團C18柱

極性官能團的嵌入，也可以通過氫鍵作用，將矽羥基或解離的矽氧負離子屏蔽起來（見下圖），進而保證堿性化合物的峰形。

圖6 月旭Ultimate® Polar-RP內(nei) 嵌極性官能團對矽氧負離子的屏蔽作用

這樣看來，分析極性親(qin) 水化合物的時候，可耐受純水的色譜柱真是優(you) 勢明顯呢，難怪老師們(men) 對月旭的色譜柱讚美有加了。耐受純水的色譜柱由於(yu) 上述種種工藝的不同，有時在方法開發的時候還能提供不一樣的保留特性，使得許多分離複雜極性樣品的問題迎刃而解。