2020版《中國藥典》四部液相色譜法修訂了，你知道嗎?

2020版藥典修訂工作正在如火如荼進行中，那你知道液相色譜法新增和修訂了哪些內(nei) 容嗎？與(yu) 2015版藥典有哪些不同嗎？在這裏就把修訂的內(nei) 容進行總結歸納。

一、檢測器新增了電霧檢測器

2020版藥典新增了電霧檢測器，大家對電霧檢測器了解嗎？

電霧式檢測器（CAD）是一種新型通用型液相色譜檢測器，具有較寬的動態監測範圍、較高的靈敏度和重複性、不依賴與(yu) 化學結構的信號響應一致性、應用廣泛和操作簡捷等優(you) 點，應用於(yu) 中性、酸性、堿性及兩(liang) 性物質等，特別是無紫外吸收、非揮發性或半揮發性物質的檢測。

與(yu) ELSD相比，CAD具有更高的檢測靈敏度、更好的日內(nei) 和日間重複性和更寬的線性範圍。很多ELSD無法檢測到的雜質，在CAD上具有較好的響應。與(yu) ELSD相比，難揮發性化合物的CAD響應與(yu) 分析物的理化性質無關(guan) ，在進入CAD的流動相組成不變的情況下，進樣量相同的不同化合物具有相同的CAD響應。換言之，CAD可用已知化合物的線性曲線定量未知化合物。此外，CAD做化合物純度分析所得數據更接近樣品的真實組成。

與(yu) UV相比，CAD的響應不受化合物紫外吸收基團的影響，半揮發和難揮發的化合物都能在CAD上具有較好的響應，可以檢測UV無法檢測到的弱紫外吸收化合物。

圖1、電霧檢測器結構及工作原理

電霧式檢測器有如下主要特點：

◾基於(yu) 該檢測器的設計原理與(yu) 結構，該檢測器總體(ti) 上靈敏度高，如在分析葡萄糖、蔗糖和乳糖時，能檢測到0.5ng的柱上樣量；

◾更高的響應一致性，如對24種化合物在相同色譜條件下分別直接進樣1μg（不接色譜柱），其響應的峰麵積的RSD值僅(jin) 為(wei) 10.7%；

◾動態檢測範圍寬，達3-4個(ge) 數量級；

◾應用廣泛，能分析小分子、大分子化合物，如氨基酸、蛋白、聚合物等；

◾使用操作直觀簡單，維護十分簡便，工作流速0.01-2.00 ml/min，兼容Micro-LC和UHPLC。

USP收錄的脫氧膽酸（USP40 NF35 S1）和EP收錄的釓布醇（Ph. Eur. 04/20/16:2735）兩(liang) 個(ge) 品種，含量測定和有關(guan) 物質測定均采用電霧檢測器。

二、對藥典方法品種正文項下規定的色譜參數調整做了詳細規定

應評價(jia) 色譜參數調整對分離和檢測的可能影響，必要時，調整的方法應進行相應的方法學驗證。調整後，係統適用性應符合要求，且色譜峰出峰順序不變。

🔶若減小進樣體(ti) 積，應保證檢測限和峰麵積的重複性；

🔶若增加進樣體(ti) 積，應使分離度和線性關(guan) 係仍滿足要求。

調整梯度洗脫色譜參數時應比調整等度洗脫色譜參數時更加謹慎，因為(wei) 此調整可能會(hui) 使某些峰位置變化，造成峰識別錯誤，或者與(yu) 其他峰合並。

三、新增了測定法項下定性分析項

明確規定了常用的定性方法主要有但不限於(yu) 以下幾種：

1、利用保留時間定性

保留時間（retention time）tR被定義(yi) 為(wei) 被分離組分從(cong) 進樣到柱後出現該組份大響應值時的時間，也即從(cong) 進樣到出現某組分色譜峰的頂點時為(wei) 止所經曆的時間，常以分（min）為(wei) 時間單位，用於(yu) 反映被分離的組分在性質上的差異。通常以在相同的色譜條件下待測組分的保留時間與(yu) 對照品的保留時間是否一致作為(wei) 待測成分定性的依據。

在相同的色譜條件下，待測成分的保留時間與(yu) 對照品的保留時間應無顯著性差異；兩(liang) 個(ge) 保留時間不同的色譜峰歸屬於(yu) 不同化合物，但兩(liang) 個(ge) 保留時間一致的色譜峰有時未必可歸屬為(wei) 同一化合物，在作未知物鑒別時應特別注意。

若改變流動相組成或更換色譜柱的種類，待測成分的保留時間仍與(yu) 對照品的保留時間一致，可進一步證實待測成分與(yu) 對照品為(wei) 同一化合物。

當待測成分（保留時間tR,1）無對照品時，可以樣品中的另一成分或在樣品中加入另一成分作為(wei) 參比物（保留時間tR,2），采用相對保留時間（RRT）作為(wei) 定性（或定位）、校正因子計算含量的方法。在品種項下，除另有規定外，相對保留時間以未扣除死時間的非調整保留時間按下式計算。

若需以扣除死時間的調整保留時間計算，應在相應的品種項下予以證明。

2、利用光譜相似度定性

化合物的全波長掃描紫外-可見光區光譜圖提供一些有價(jia) 值的定性信息。待測成分的光譜與(yu) 對照品的光譜的相似度可用於(yu) 輔助定性分析。

二極管陣列檢測器可得到更多的信息，包括色譜信號、時間、波長的三維色譜光譜圖，既可用於(yu) 輔助定性分析，還可用於(yu) 峰純度分析。

3、利用質譜檢測器定性

利用質譜檢測器提供的色譜峰分子質量和結構的信息進行定性分析，可獲得比僅(jin) 利用保留時間或增加光譜相似性進行定性分析更多的、更可靠信息，不僅(jin) 可用於(yu) 已知物的定性分析，還可提供未知化合物的結構信息。