
您在日常的實驗過程中用的色譜柱有沒有壽命過短的問題?不但實驗成本攀升,實驗效果都沒法保證。我們(men) 今天就邀請月旭科技的工程師來為(wei) 您解答有關(guan) 色譜柱使用壽命的相關(guan) 問題,助您的柱子“益壽延年”!
為(wei) 什麽(me) 檢測該項目使用不同品牌的色譜柱,壽命均在100針左右?
1)有可能的原因是樣品組分吸附在色譜柱的前段。可能是由於(yu) 樣品在流動相中的溶解度低而沉澱出來的,也有可能是強吸附,或是樣品本身與(yu) 填料表麵發生微弱的不可預知的化學反應。樣品溶液本身的pH值在色譜柱的耐受臨(lin) 界值附近,而且進樣體(ti) 積較大(內(nei) 徑4.6mm,上樣體(ti) 積在50ul以上)對柱頭端的填料影響比較大,通常這樣的情況伴隨柱壓升高。
解決(jue) 方法:選擇合適的樣品前處理技術,去除掉強保留物質。使用保護柱,盡量選擇與(yu) 分析柱同種填料,同種鍵合方法的保護柱。如果使用不同品牌的填料、裝填工藝的保護柱,在分離能力和保護分析柱方麵可能得不到好的效果。也不要使用更大粒徑的保護柱,更大粒徑或者裝填較差的保護柱會(hui) 因為(wei) 它的峰展寬作用而導致分離能力下降。
2)鍵合相脫落變性。色譜條件多方作用導致壽命短,這是目前的色譜技術不能解決(jue) 的,一般情況下小基團鍵合相更容易被水解而脫落。流動相中鹽濃度越高,越容易引起水解。這種情況下,就隻能重新開發色譜條件。
為(wei) 什麽(me) 該品牌的色譜柱一直很好,就這一支壽命異常短?
確定一下使用頻率、衝(chong) 洗頻率、流動相的更換頻率、流動相的試劑品牌、純度等是否和之前一樣,如果有更換,那壽命有差異是正常現象。如果都與(yu) 之前相當,那需要檢查這支色譜柱是否受過劇烈震蕩,比如:不小心摔過,或者運輸過程中受過劇烈震蕩,建議與(yu) 廠家的技術人員溝通。
為(wei) 什麽(me) 使用該品牌的支色譜柱用於(yu) 方法建立時壽命長,方法建立後,開始進行方法驗證時,卻覺得壽命短?
這種情況的發生,很大的原因是,前期建立方法時,並不是連續做項目,而是不停地更換流動相。這就意味著色譜柱的衝(chong) 洗頻率比較高,而更換的流動相的清潔度也是比較好的。建立方法的時候很難連續進樣多次,有時候甚至一周才做一次項目,這樣就會(hui) 產(chan) 生支柱子使用時間更久的錯覺。而方法建立後,做方法驗證,流動相固定下來,就會(hui) 一次性配置較大體(ti) 積的流動相,這樣流動相較易變質,有時肉眼不能直接分辨。而且會(hui) 連續多次過夜進樣,這樣對色譜柱的衝(chong) 洗也不是很及時。這些都是可能導致色譜柱壽命變短的因素。