問君幾多愁，恰似一支氨基柱超難留!

當您使用氨基柱時，有沒有遇到在使用一段時間之後，柱效下降、柱壓升高，使得檢測結果逐漸達不到要求？或者柱子在使用過程中出現異常幹擾峰，或者保留時間出現漂移，與(yu) 之前的檢測結果有較大偏差？又或者是柱子的專(zhuan) 一選擇性，使得在特定色譜條件下方法得不到重現，分離度、柱效和拖尾因子達不到檢測要求？由於(yu) 氨基柱的*性，進而使用問題較多，這給我們(men) 帶來了很多的困擾，那麽(me) 今天就來談談氨基柱。

氨基柱的鍵合官能團是氨丙基，這種官能團比常規的C18、C8和C4易水解，所以在使用氨基柱之前，我們(men) 就要做好心理準備，氨基柱的使用壽命比常規色譜柱要短很多。

氨基柱既可以做正相，也可以反相使用，而這兩(liang) 相溶劑是不能互溶的，所以如果在正反相進行切換使用時，需要用異丙醇進行過渡。下麵將分別談談氨基柱在正反兩(liang) 相中的使用與(yu) 維護注意事項。

反 相

✨反相使用時，如果流動相不含有酸堿鹽，做樣結束直接用100%的乙腈進行衝(chong) 洗和保存即可。若含有酸堿鹽，首先用60%的乙腈水衝(chong) 洗40min，然後再用100%的乙腈衝(chong) 洗和保存；

✨反相使用時，注意流動相的pH範圍，pH越低越容易水解，理想的pH範圍是3-7，流動相中水的比例越高，也越容易水解。

PS：柱子使用後，衝(chong) 洗後建議保存在純的有機相中，這樣能獲得良好的保存效果以及延長柱子的使用壽命。此外如柱子出現了柱壓升高，峰形異常，柱效和分離度下降等異常情況後，可以先用過渡流動相衝(chong) 掉色譜柱的鹽，再分別以做樣流速用100%乙腈→100%甲醇→100%異丙醇→100%乙腈進行衝(chong) 洗，每項衝(chong) 洗30分鍾，其中異丙醇由於(yu) 黏度大，所以需要降低流速。

正 相

柱子的衝(chong) 洗使用100%的正己烷，然後使用正己烷/異丙醇（90/10）進行保存。

此外，正相色譜中，固定相的水分含量是影響選擇性的關(guan) 鍵參數，而流動相存在的水分含量會(hui) 影響到保留時間和分離度，所以出現保留時間波動較大，可以歸因於(yu) 固定相和流動相中水分的變化，建議對氨基柱進行除水：

✨去除固定相中的水分：

用含2.5%二甲氧基丙烷（dimethoxypropane）和2.5%冰醋酸的正己烷衝(chong) 洗色譜柱30倍柱體(ti) 積；

✨使用水分含量可控的流動相（比如水半飽和）：

半飽和流動相配置：將無水的非極性流動相分成兩(liang) 半，其中一半中加入一定量水，並混勻攪拌約1小時，靜止分層後，將多餘(yu) 的水相全部除去，將兩(liang) 部分重新混合在一起就配成了“半飽和”流動相。

PS：如果出現柱壓升高、分離度和柱效下降等異常情況，建議用100%異丙醇→100%甲醇→100%異丙醇以分析流速分別衝(chong) 洗，每項衝(chong) 洗40分鍾。同樣，異丙醇衝(chong) 洗時需降低流速。

乳糖專(zhuan) 用柱

月旭還有一款特殊氨基柱，乳糖專(zhuan) 用柱 Xtimate®Lactose-NH2，我們(men) 建議采用純乙腈進行衝(chong) 洗和保存，如果柱壓升高，分離度和柱效下降等異常情況，可以用純甲醇→純乙腈→純異丙醇→純乙腈分別進行衝(chong) 洗，每項3小時。

在使用乳糖專(zhuan) 用柱檢測時，如果出現噪音增加、漂移增大、分離度達不到或者柱效不夠等異常情況，需要注意以下幾點：

✨流動相混合在一起，充分搖勻，真空抽濾，超聲脫氣10分鍾，使用一個(ge) 通道運行，不要使用在線過濾器；

✨進樣體(ti) 積需要嚴(yan) 格按照藥典要求，進樣10μL，盡可能地將定量環更換成10μL定量環，減小柱外死體(ti) 積的影響，下麵左圖和右圖分別是進樣20μL和進樣量10μL的色譜圖，對比非常明顯；

✨由於(yu) 示差檢測器對溫度的變化比較敏感，建議將柱溫箱用幹毛巾或者幹的棉花填充，充當傳(chuan) 熱介質，使得有更好的基線噪音和色譜效果。

由於(yu) 氨基鍵合官能團*的極性，易水解，導致氨基柱的使用壽命較其它常規色譜柱要短，所以我們(men) 需要認清這個(ge) 事實。希望以上的使用和維護方法可以幫到您，極大地延長氨基柱的壽命。