氨基柱那些事

整個(ge) 色譜柱家族中，擁有許許多多的不同特色的柱子。不同性質的色譜柱有著其*的作用方式。表一列出了日常工作中常規使用的幾類色譜柱的作用方式：

表一：不同填料色譜柱的作用方式

從(cong) 上表可以看到，我們(men) 常使用的C8/C18僅(jin) 能用於(yu) 反相色譜，苯基與(yu) 氟苯基也基本用於(yu) 反相色譜；陰/陽離子交換（SCX/SAX）顧名思義(yi) 則用於(yu) 離子交換色譜了；而相對更少用的CN（氰基）、NH2（氨基）、矽膠色譜柱則有多種作用方式，或者單*種方式或者混合模式。

上表中NH2（氨基柱）則比較搶眼，表現的像個(ge) 選手。從(cong) 反相到正相，包括時下熱門的HILIC，甚至於(yu) 離子交換模式均可以產(chan) 生。那麽(me) ，這個(ge) 選手（NH2）是否就可以替代其他色譜柱了呢？答案當然是否定的。不僅(jin) 僅(jin) 在於(yu) 其選擇性有很大的差異，更重要的，是氨基的色譜柱壽命普遍不長。

如果說C18是來自長壽村的，那氨基柱一定來自非洲的津巴布韋。壽命的差異不是一星半點。不同品牌的氨基柱，必然也會(hui) 有壽命上的差異，但是影響更多的，是使用條件。

我們(men) 所說的氨基柱，通常是指矽膠基質鍵合氨丙基，如圖一所示：

我們(men) 知道，脂肪鏈末端的氨基通常堿性較強，以正丙胺為(wei) 例，可推測氨基柱末端的氨基pKa應該也約為(wei) 10：

我們(men) 還知道，作為(wei) 矽膠基質的色譜柱，常規使用pH範圍是2~8。過低的pH，鍵合相會(hui) 斷裂，過高的pH，矽膠將溶解。該柱子固有的自身帶進的氨基便是矛盾的存在，必然會(hui) 影響壽命。此外，越短的鍵合相，壽命也可能越短。

在用於(yu) 正相使用過程當中，壽命會(hui) 相對好上一些。當用於(yu) RP/HILIC模式時，特別是添加有緩衝(chong) 鹽的緩衝(chong) 液時，甚至某些時候測酸性很強的樣品時，便會(hui) 導致填料流失從(cong) 而大大縮短色譜柱的使用壽命。

末端的氨基極易質子化，成為(wei) -NH3+，在分析某些帶有電負性較強基團的組分時，容易造成拖尾情況。微環境的離子強度可能也會(hui) 影響色譜柱的壽命。

氨基柱是非常“複雜”和“脆弱”的色譜柱，這就要求我們(men) 必須更加細心的去維護。1、比如每次使用前先接上兩(liang) 通，確保儀(yi) 器係統中其他項目殘留的流動相已被置換*；2、比如在用於(yu) 反相模式時，在開始使用前先用含有一定比例水相的不含緩衝(chong) 鹽的流動相過渡，而不要直接上帶有鹽相，特別是較高鹽相的流動相——這是因為(wei) 一般情況下，色譜柱都保存在純乙腈/純正相溶劑（如是正相溶劑，過渡模式需要更換，這個(ge) 找機會(hui) 在講過）中，不過渡的情況下很可能發生鹽析而破壞柱子，導致柱子壽命縮短；3、比如使用中確保不要配錯流動相，防止溶劑走空等；4、再比如使用後確保清除*柱子中的緩衝(chong) 鹽，並保存在純有機相中（ACN）中；5、後需要提到的一點是，盡管4中要求衝(chong) 洗*，但是並不是代表可以一直衝(chong) 洗一直衝(chong) 洗，壽命跟流經柱子的流動相體(ti) 積也在一定情況下成反比，我們(men) 必須找到一個(ge) 經綜合考慮後相對較優(you) 的中間點，如果無法確認是否衝(chong) 洗幹淨，我們(men) 一般認為(wei) ，10~20個(ge) 柱體(ti) 積基本上就能保證衝(chong) 洗幹淨。柱體(ti) 積怎麽(me) 算？小編之前的文章中肯定有提到，對於(yu) 內(nei) 徑4.6mm的色譜柱，一個(ge) 柱體(ti) 積簡易的計算方式是0.1*L（柱長cm）。請記住衝(chong) 洗的時間，定個(ge) 鬧鍾，防止衝(chong) 洗過渡而降低柱子的使用壽命。

該類柱子的使用帶來的另外一個(ge) 問題是，隨著使用時間的增加，鍵合相不可避免的流失，重現性便會(hui) 有所變化，需要特別關(guan) 注。

當然，對於(yu) 該類柱子，矽膠基質有常規的，有雜化的，有封尾的有不封尾的，壽命當然也會(hui) 表現的不一樣。我們(men) 關(guan) 心的選擇性和價(jia) 格，必然也會(hui) 有一些差異。至於(yu) 選哪個(ge) ，小編的回答就是萬(wan) 金油，適合的就是zui hao的。

關(guan) 於(yu) 該類色譜柱更加詳細的使用方式，還是請參考每根柱子自帶的說明書(shu) ，嚴(yan) 格使用，便能保護好您的柱子。