流動相內(nei) 有氣泡,關(guan) 閉泵,打開泄壓閥,打開p urge鍵,清洗脫氣,氣泡不斷從(cong) 過濾器冒出,進入流動相,無論打開p urge 鍵幾次,都無法清除不斷產(chan) 生的氣泡。
原因過濾器長期沉浸於(yu) 乙酸銨等緩衝(chong) 液內(nei) ,過濾器內(nei) 部由於(yu) 黴菌的生長繁殖,形成菌團,阻塞了過濾器,緩衝(chong) 液難以流暢地通過過濾器,空氣在泵的壓力作用下經過濾器進入流動相。
處理過濾器浸泡於(yu) 5 %硝酸溶液中,超聲清洗幾分鍾即可;亦可將過濾器浸泡於(yu) 5 %硝酸溶液中12~36 小時,輕輕震蕩幾次,再將過濾器用純水清洗幾次,打開泄壓閥,打開p urge 鍵,清洗脫氣,如仍有氣泡不斷從(cong) 過濾器冒出,繼續將過濾器浸泡於(yu) 5 %硝酸溶液中,如沒有氣泡不斷從(cong) 過濾器中冒出,說明過濾器內(nei) 部的黴菌菌團已被硝酸破壞,流動相可以流暢地通過過濾器。打開泄壓閥,打開泵,流速調至1. 0~3. 0ml/ min,純水衝(chong) 洗過濾器1 小時左右。即可將過濾器清洗幹淨。關(guan) 閉泄壓閥,純甲醇衝(chong) 洗半小時即可。
故障2
柱壓高原因⑴緩衝(chong) 液鹽分如(乙酸銨等) 沉積於(yu) 柱內(nei) ; ⑵樣品汙染沉積。
處理對於(yu) *種情況先用40~50 ℃的純水,低速正向衝(chong) 洗柱子,待柱壓逐漸下降後,相應提高流速衝(chong) 洗,柱壓大幅度下降後,用常溫純水衝(chong) 洗,之後用純甲醇衝(chong) 洗柱子30 分鍾; 對於(yu) 第二種情況,由樣品的沉積引起汙染的C18柱,和純水反向衝(chong) 洗柱子,然後換成甲醇衝(chong) 洗,接著用甲醇+ 異丙醇(4 + 6) 衝(chong) 洗柱子(衝(chong) 洗時間的長短由樣品汙染的情況而定),再用換成甲醇衝(chong) 洗,然後用純水衝(chong) 洗,zui後甲醇衝(chong) 洗正向衝(chong) 洗柱子30 分鍾以上。
故障3
既無壓力指示,又無液體(ti) 流過[1 >;。
原因⑴泵密封墊圈磨損; ⑵大量氣泡進入泵體(ti) 。
處理對於(yu) *種情況,更換密封墊圈;對於(yu) 第二種情況,在泵作用的同時,用一個(ge) 50ml 的玻璃針筒在泵的出口處幫助抽出空氣。
故障4
壓力波動大,流量不穩定.
原因係統中有空氣或者單向閥的寶石球和閥座之間夾有異物,使得兩(liang) 者不能密封。
處理工作中注意觀察流動相的量,保證不鏽鋼濾器沉入儲(chu) 液器瓶底,避免吸入空氣,流動相要充分脫氣[2 >;。如為(wei) 單向閥和閥座之間夾有異物,拆下單向閥,放入盛有丙酮的燒杯用超聲波清洗.
故障5
出峰不佳,峰分叉。
原因⑴色譜柱被汙染; ⑵柱頭填料塌陷。
處理對於(yu) *種情況,先用純水反向衝(chong) 洗柱子,然後換成甲醇衝(chong) 洗,接著用甲醇+ 異丙醇(4 + 6) 衝(chong) 洗柱子(衝(chong) 洗時間的長短由樣品汙染的情況而定),再換成甲醇衝(chong) 洗,然後用純水衝(chong) 洗,zui後甲醇衝(chong) 洗正向衝(chong) 洗柱子30 分鍾以上。如衝(chong) 洗後依然出峰不佳,則考慮第二種情況。對於(yu) 第二種情況,擰開柱頭,檢查柱填料是否硬結或塌陷。去除硬結部分(汙染的填料),裝入新填料,滴一滴甲醇,填料下陷,再填,用與(yu) 柱內(nei) 徑相同的頂端平滑的不鏽鋼杆壓緊,再填平,滴甲醇,再壓緊反複幾次,直至裝滿填平[2 >;。柱頭用甲醇衝(chong) 洗幹淨,擦淨柱外壁的填料,擰緊柱頭,用純甲醇衝(chong) 洗30 分鍾以上。
故障6
峰麵積重複性不佳。
原因⑴進樣閥漏液; ⑵加樣針不到位。
處理對於(yu) *種情況更換進樣閥墊圈; 對於(yu) 第二種情況保證加樣針插到底,注射樣品溶液後須快速、平穩地從(cong) LOAD 狀態轉換到INJ EC T 狀態,以保證進樣量的準確。日常工作中,液相色譜儀(yi) 的保養(yang) 非常重要,如要注意不要讓空氣進入輸液係統和高壓泵中,儲(chu) 液器內(nei) 的溶液如長時間未用應清洗儲(chu) 液器並更換溶液,每次用完色譜儀(yi) 後緩衝(chong) 液要用純水衝(chong) 洗幹淨,防止無機鹽析出或沉積; 樣品的前處理也很重要,任何樣品都要盡可能地去除雜質,*溶解,盡量減少對色譜柱的汙染,以延長色譜柱的使用壽命,同時避免注射過濃的樣品溶液,以免殘留液在進樣閥內(nei) 析出固體(ti) 引起堵塞; 色譜柱作好標記,用於(yu) 不同分析目的的色譜柱不要混用等。
注意事項
1) 流動相均需色譜純度,水用20M的去離子水。脫氣後的流動相要小心振動盡量不引起氣泡。
2) 柱子是非常脆弱的,*次做的方法,先不要讓液體(ti) 過柱子。
3) 所有過柱子的液體(ti) 均需嚴(yan) 格的過濾。
4) 壓力不能太大,不要超過150kgf/cm2 .
5) 因為(wei) 緩衝(chong) 試劑遇有機溶劑,會(hui) 結晶,有損色譜柱,所以,每次由有機相變流動相或流動相變有機相均需用蒸餾水清洗。